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作者：张会;马佳欣;李柱;邵志伟;樊俊博;李杰;
单位：东北农业大学生命科学学院;
摘要：为提高木聚糖酶在黑曲霉中的分泌表达，采用同源重组定点整合技术将含有1或2个AnxynB基因表达盒的重组表达载体质粒pSZHG6R-AnxynB1R和pSZHG6R-AnxynB2R转入Aspergillus niger TH-2上高表达的glaA基因位点，获得纯合同源重组转化子X1R和X2R；重组菌株摇瓶发酵上清液，经SDS-PAGE、酶活性和实时荧光定量PCR检测。结果表明：通过多拷贝策略，木聚糖酶酶活性提高61.27%,AnxynB基因转录水平提高102.56%，同时增加基因剂量，触发UPR响应以缓解内质网应激。重组木聚糖酶最适反应温度为50℃，最适反应pH为5.5，在此条件下酶活性最高为7 596.43 U·mL~(-1)。
关键词：木聚糖酶;;黑曲霉;;多拷贝;;酶学性质
基金资助：中国博士后科学基金项目(2019M651149)
