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作者:崔明娟;孙以新;胡小梅;
单位:东北农业大学生命科学学院;黑龙江省绿色食品科学研究院;
摘要:应用生物信息学分析转录因子TeClr1,采用基因过表达和沉默技术,分别构建OE-Teclr1和RNAiTeclr1菌株探索转录因子TeClr1功能,以提高内生篮状菌(Talaromyces endophyticus)NEAU-6纤维素酶产量。结果表明:与野生型(WT)菌株相比,OE-Teclr1菌株生长更快、产生的水解圈更大,RNAi-Teclr1菌株生长更慢、产生的水解圈更小;随着培养时间增加,OE-Teclr1菌株中Teclr1基因表达量始终高于WT菌株,而RNAi-Teclr1菌株中Teclr1持续下调表达。在合成纤维素酶方面,相较于WT菌株,OE-Teclr1菌株产滤纸酶(FPase)的能力提高53%,且菌株产β-葡萄糖苷酶(BG)和木聚糖酶(Xylanase)的能力也分别提高38%和27%,内切葡聚糖苷酶(EGCMCase)和对硝基-纤维二糖苷酶(p NPCase)的产纤维素酶能力也均提高13%以上。RNAi-Teclr1菌株的产纤维素酶能力在发酵期内均相对较弱,且产纤维素酶能力一直低于OE-Teclr1和WT菌株。综上所述,转录因子TeClr1可能在菌株产纤维素酶中、后期发挥对纤维素酶基因的激活作用,即通过控制Teclr1基因表达影响纤维素酶基因表达水平。
关键词:丝状真菌;;篮状菌;;纤维素酶;;转录激活因子
基金资助:黑龙江省重点研发计划项目(GA23B15)