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作者：蒋良君;卢先州;
单位：南华大学衡阳医学院附属南华医院消化内科;南华大学衡阳医学院附属南华医院肝胆外科;
摘要：目的 探讨沉默circFADS2对结直肠癌(CRC)细胞铁死亡的影响及其机制。方法 以人结肠腺癌细胞系SW480作为研究对象，分别将circFADS2 siRNA干扰质粒(si-circFADS2)及其阴性对照si-NC、miR-152-3p inhibitor及其阴性对照inhibitor-NC、miR-152-3p mimics及其阴性对照mimics NC、SLC7A11过表达质粒(oe-SLC7A11)及其阴性对照vector转染至SW480细胞中，噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性；化学法检测细胞中亚铁离子(Fe~(2+))、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)活性水平；二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)探针法检测细胞中活性氧(ROS)水平；实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测细胞中miR-152-3p和SLC7A11 mRNA表达水平；Western blot检测细胞中铁死亡相关蛋白SLC7A11、GPX4表达水平；双荧光素酶报告基因实验验证miR-152-3p与circFADS2之间的海绵吸附关系，以及miR-152-3p与SLC7A11之间的靶向调控关系。结果 与blank组比较，si-circFADS2组细胞增殖活性降低，细胞中Fe~(2+)、MDA和ROS水平升高，SOD和GSH水平降低；同时，细胞中miR-152-3p表达水平升高，SLC7A11和GPX4蛋白表达水平降低(均P<0.05)。与si-circFADS2组比较，si-circFADS2+inhibitor组细胞增殖活性升高，细胞中Fe~(2+)、MDA和ROS水平降低，SOD和GSH水平升高；同时，细胞中miR-152-3p表达水平降低，SLC7A11和GPX4蛋白表达水平升高(均P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果显示，SLC7A11是miR-152-3p的下游靶基因。结论 沉默circFADS2可诱导CRC细胞铁死亡，其机制可能是通过靶向调控miR-152-3p/SLC7A11信号轴实现的。
关键词：circFADS2;;结直肠癌;;SW480细胞;;铁死亡;;miR-152-3p;;溶质载体家族7成员11
基金资助：湖南省科技创新计划社会化出资项目(编号：2020SKC2009);; 湖南省自然科学基金(编号：2024JJ7461);; 湖南省卫生健康委科研计划项目(编号：D202303038378);; 衡阳市科技局指导性计划(编号：202222035832)~~
