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作者：甄二娜;吴余玲;胡姗姗;
单位：安徽医科大学药学科学学院临床药理研究所,抗炎免疫药物教育部重点实验室;中国科学技术大学附属第一医院检验科;
摘要：目的 探究肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在小鼠利什曼原虫脾脏感染中的作用。方法 在小鼠的右侧后足皮下注射利什曼原虫的前鞭毛体建立感染模型。测量小鼠足垫厚度和体质量监测感染；通过HE染色观察感染后脾脏病理学变化；流式细胞术检测脾脏内淋巴细胞和巨噬细胞的改变；间接免疫荧光法检测脾脏内精氨酸酶1(Arg-1)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达水平；体外调控TNF-α观察对巨噬细胞感染利什曼原虫的影响。结果 与B6.WT小鼠相比，B6.TNF~(-/-)小鼠感染后42 d脾脏明显肿大，结构紊乱，各种细胞浸润并分散在整个脾脏中。流式结果显示，感染利什曼原虫后，小鼠脾脏中T细胞和B细胞比例未发生明显改变，而CD11b单核细胞明显增加；免疫荧光结果显示，M2型单核/巨噬细胞的标志物Arg-1在B6.TNF~(-/-)小鼠脾脏中高表达(P<0.05);B6.WT小鼠的脾脏中iNOS表达相对较强(P<0.05);体外研究显示，TNF-α缺失或抑制TNF-α后，腹腔巨噬细胞感染利什曼原虫明显增加(P<0.01),而加入TNF-α后显著抑制了该细胞的感染(P<0.01)。结论 B6.TNF~(-/-)小鼠后足垫皮下接种利什曼原虫后发生脾脏感染，可能与TNF-α的缺失导致巨噬细胞发生M2型分化和一氧化氮产生减少有关。
关键词：利什曼原虫;;肿瘤坏死因子-α;;脾脏;;巨噬细胞;;流式分析;;免疫反应
基金资助：国家自然科学基金项目(编号：81703524)~~
