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作者：李桂楠;杨妮;罗微;张佳琪;胡志航;熊爱生;郝建楠;庄静;
单位：南京农业大学园艺学院,茶叶科学研究所,农业农村部华东地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室;南京农业大学,作物遗传与种质创新利用全国重点实验室;
摘要：茶树是我国重要的叶用经济作物，其生长发育受植物激素的影响。油菜素甾醇（BRs）是六大植物激素之一，参与调控茶树生长发育和逆境的响应，类固醇5α-还原酶是植物油菜素甾醇生物合成途径中的关键酶。为研究茶树中类固醇5α-还原酶的特性，从茶树‘舒茶早’中克隆获得CsDET2，分析该基因所编码蛋白的理化性质、二级与三级结构、序列特征、系统发育树、亚细胞定位，启动子顺式作用元件，并检测其在不同器官、非生物胁迫、光周期为12L/12D时的表达模式。结果显示，CsDET2的开放阅读框为783 bp，共编码260个氨基酸；CsDET2的分子量为30 158.97 Da，理论等电点为9.28，主要由α-螺旋和随机卷曲组成，含有典型的类固醇脱氢酶（Steroid dehydrogenase）结构域。与15个物种的DET2序列的多重比对结果显示，氨基酸序列的一致性达78.25%。系统发育树分析结果显示CsDET2与山梨猕猴桃AfDET2亲缘关系较近。亚细胞定位试验结果显示CsDET2定位在细胞质中。顺式作用元件分析显示，CsDET2的启动子区域包含4种光响应元件、4种逆境响应元件、3种激素响应元件以及5种转录因子结合位点。荧光定量结果显示，CsDET2在各器官中均有表达，在老叶中表达量最高；光周期为12L/12D时，CsDET2在白天的表达量先降低后升高，在夜晚的表达量先升高后降低，夜晚的表达水平整体高于白天的。CsDET2的表达受光周期调节，并响应高温与高盐等非生物胁迫，同时受外源赤霉素的调控。本研究为进一步研究茶树类固醇5α-还原酶的功能提供基础。
关键词：茶树;;油菜素甾醇;;生物信息学分析;;光周期;;非生物胁迫
基金资助：江苏省政策引导类计划（SZ-LYG202126）;; 园艺种质资源保护和创新计划（JSFEM-202212）;; 江苏高校优势学科建设项目（PAPD）
