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作者：涂一怡;张幼;徐婷;陈俊杰;王玉春;吕务云;
单位：浙江农林大学茶学与茶文化学院;
摘要：山茶炭疽菌Colletotrichum camelliae是引起茶炭疽病的优势病原菌，该病害可致茶树大量发病叶片脱落，严重影响茶叶产量，造成较大的经济损失。因此，早期及时检测茶树叶片中有无C. camelliae侵染，对生产上及时防治茶炭疽病有重要意义。基于环介导等温扩增（Loop-mediated isothermal amplification,LAMP）技术，以C. camelliae中1个编码LEA(Late embryogenesis abundant)结构域蛋白的特异基因作为靶标，设计并筛选了3对特异性LAMP引物，包括1对外引物、1对内引物和1对环引物。随后通过特异性和灵敏度检测，以及室内接种和田间发病组织检测试验，建立了C. camelliae的LAMP检测方法。该方法在65℃下反应30 min效果最佳，检测结果可通过2%琼脂糖凝胶电泳验证和SYBR GreenⅠ显色判断。在特异性检测试验中，仅C. camelliae扩增后呈阳性反应；灵敏度检测试验中，该方法对C. camelliae基因组DNA模板的最低检测质量浓度为100 ag·μL~(-1)；对室内接种C. camelliae后的病叶和田间18个茶树品系的炭疽病病叶的检测结果显示，该LAMP方法能准确地检测出C.camelliae。综上，本研究建立了1种C. camelliae的LAMP检测方法，具有快速简便、灵敏度高等优点，可实现C. camelliae的特异性检测及茶炭疽病的快速诊断。
关键词：茶炭疽病;;山茶炭疽菌;;环介导等温扩增技术;;病害检测;;特异基因
基金资助：浙江省农业新品种选育重大科技专项（2021C02067-7）;; 浙江省大学生科技创新活动计划（新苗人才计划）项目（2024R412B052）
