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作者：黎量;李雨恒;彭长恩;王蛟龙;吴纯洁;
单位：成都中医药大学药学院;成都中医药大学附属医院;成都市郫都区中医医院;成都中医药大学中医药创新研究院/交叉学科研究院;
摘要：目的:基于网络药理学、分子对接结合体内验证的方法探究花椒提取物外用对特应性皮炎(atopic dermatitis, AD)小鼠的作用机制。方法:利用UPLC-Q-Orbitrap HRMS技术对花椒提取物的化学成分进行快速识别和鉴定；通过Swiss Target Prediction、SEA平台预测花椒提取物成分的潜在靶点，通过GeneCards和Drugbank数据库收集AD相关靶点，运用String数据库构建关键靶点PPI网络图；基于Metascape数据库进行KEGG分析，利用Cytoscape软件构建药物-成分-靶点-疾病-通路网络图；采用Discovery Studio的CDOCKER模块进行分子对接。构建AD模型小鼠，给予外用花椒提取物0.02、0.03 g/kg进行药理实验验证，观察AD小鼠抓挠次数、计算耳厚度差和脾脏指数；ELISA法检测小鼠皮肤白介素-6(IL-6)、IL-13、IL-31、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和血清免疫球蛋白E(IgE)含量；HE染色法观察皮肤组织病理；免疫组化法检测皮肤组织TRPV1和TRPV3的阳性表达。结果:鉴定出花椒提取物中22个化学成分，得到成分相关靶点194个，疾病相关靶点共1 680个，交集靶点68个；通过PPI网络筛选获得核心靶点29个；KEGG通路富集分析发现，TRP通道的炎性介质调节通路可能是花椒提取物作用于AD的主要信号通路；药物-成分-靶点-疾病-通路网络图显示花椒提取物中羟基-ε-山椒素、羟基-α-山椒素、羟基-β-山椒素排名靠前，可能是治疗AD的重要成分。瞬时电位离子通道(TRP通道)中的TRPV1、TRPA1排名靠前，提示其是治疗疾病的重要靶点。分子对接表明，羟基-ε-山椒素、羟基-α-山椒素、羟基-β-山椒素与TRPV1、TRPV3有良好的结合亲和力。动物实验结果显示，与模型对照组比较，花椒提取物外用各剂量组AD小鼠皮损评分降低(P<0.01),AD小鼠抓挠次数、耳厚度差和脾脏指数降低(P<0.01),AD小鼠皮肤IL-6、IL-13、IL-31含量降低(P<0.01),花椒提取物0.03 g/kg组皮肤TNF-α含量和血清IgE含量明显降低(P<0.05),病理性增厚和皮肤炎性细胞浸润明显减轻，TRPV1和TRPV3的阳性表达显著下调(P<0.01)。结论:花椒提取物外用可以有效缓解AD的瘙痒和炎症，其作用机制可能是抑制TRPV1、TRPV3通道的活性或下调TRPV1、TRPV3的表达。
关键词：花椒提取物;;特应性皮炎;;超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱;;网络药理学;;分子对接;;瞬时受体电位通道
基金资助：四川省科技厅项目(编号：2025ZNSFSC1822);; 四川省中医药管理局项目(编号：2020HJZX001);; 成都中医药大学“杏林学者”学科人才科研提升计划医院专项(编号：XJ2022001301);成都中医药大学院校联合基金项目(编号：LH202402041)
