来源:期刊VIP网 时间:
作者:刘春志;卜献忠;张鼎;杨汉立;钟远鸣;汤立蓉;许伟;
单位:广西中医药大学研究生院;河南中医药大学第一附属医院骨一科;广西中医药大学第一附属医院脊柱骨科;四川大学华西第二医院中医科;
摘要:目的:探讨脊髓伤方含药血清对缺氧/复氧(Oxygen and glucose deprivation/reoxygenation, OGD/R)诱导脊髓神经元线粒体功能的影响。方法:提取原代脊髓神经元并鉴定,制备脊髓伤方含药血清并筛选最佳干预浓度。将脊髓神经元随机分为正常对照组、模型组、空白血清组、Mdivi-1(Drp1抑制剂)组、脊髓伤方含药血清组,除正常对照组外其余各组通过OGD/R诱导脊髓神经元损伤,各组予对应干预刺激后收集细胞,试剂盒检测细胞上清中LDH、ATP水平;流式细胞术检测细胞凋亡;免疫荧光检测SUMO1、Drp1表达;qRT-PCR和Western Blot检测SUMO1、SENP3、Drp1、OPA1、Mfn1、Mfn2、Fis1 mRNA和蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型组神经元培养上清液LDH水平和神经元凋亡率显著升高,ATP水平显著降低,SUMO1、SENP3、Drp1、Fis1 mRNA和蛋白表达显著升高,OPA1、Mfn1、Mfn2 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.0001)。与模型组比较,脊髓伤方含药血清组和Mdivi-1组神经元培养上清液LDH水平和神经元凋亡率显著降低,ATP水平显著升高,SUMO1、SENP3、Drp1、Fis1 mRNA和蛋白表达显著降低,OPA1、Mfn1、Mfn2 mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.0001)。结论:脊髓伤方含药血清可通过调控SUMO1-Drp1轴减轻OGD/R诱导的脊髓神经元损伤,恢复线粒体分裂融合平衡,从而缓解神经元凋亡,发挥保护作用。
关键词:脊髓伤方;;脊髓型颈椎病;;脊髓神经元;;SUMO1-Drp1轴;;线粒体分裂融合
基金资助:国家自然科学基金项目(82260942);国家自然科学基金青年科学基金项目(82405439);; 广西中医药大学科技处项目(XP023091);; 河南省中医药科学研究专项课题(2023ZXZX1003);; 河南中医药大学第一附属医院“博士科研启动基金”(2023BSJJ006)