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作者：郝路格;张健东;张胜霄;谷泽龙;刘红彬;沈丽霞;李炜;
单位：河北北方学院药学院;河北省神经药理学重点实验室;河北省神经损伤与修复重点实验室;
摘要：目的 探讨脑蛋白水解物（CH）通过调控未折叠蛋白反应（UPR）-内质网相关蛋白降解（ERAD）信号通路改善毒胡萝卜素（TG）诱导的SH-SY5Y细胞内质网应激（ERS）的作用机制。方法 采用TG处理SH-SY5Y细胞构建ERS模型，筛选TG与CH作用浓度并检测细胞核与内质网形态学变化；Western blot检测UPR-ERAD通路及凋亡标志物蛋白质表达；CH联合IRE1α抑制剂（STF-083010）和ATF6抑制剂（Ceapin-A7）验证通路相互作用，并通过蛋白质对接预测IRE1α与ATF6、HRD1、SEL1L的相互作用。结果 与正常对照组相比，TG模型组细胞存活率显著下降（P<0.01），并伴随细胞核固缩和内质网形态萎缩，UPR与ERAD相关蛋白质caspase-12、CHOP、XBP1s、ATF6、SEL1L和HRD1的表达水平显著升高（P<0.01），其中XBP1s和HRD1的荧光强度明显增强（P<0.01）；与TG模型组相比，CH组、CH+STF-083010组和CH+Ceapin-A7组细胞存活率显著提高（P<0.01），同时caspase-12、CHOP、XBP1s、ATF6、HRD1和SEL1L蛋白质表达下调（P<0.05）,XBP1s和HRD1的荧光强度明显减弱（P<0.05）；与CH组相比，CH+STF-083010组XBP1s、ATF6、HRD1和SEL1L蛋白表达进一步下调（P<0.05）,CH+Ceapin-A7组ATF6和XBP1s蛋白表达进一步下调（P<0.05）。蛋白质对接显示，IRE1α与ATF6、HRD1、SEL1L间存在较强的相互作用。结论 CH可能通过调节IRE1α介导的UPR与ERAD之间的动态平衡，实现跨通路的协同调控，从而发挥神经保护作用。
关键词：脑蛋白水解物;;毒胡萝卜素;;内质网应激;;内质网相关蛋白降解;;蛋白质-蛋白质对接
基金资助：河北省自然基金项目（2022405044）;; 河北省神经损伤与修复重点实验室开放课题（NJKF202402）;; 河北北方学院自然科学研究项目（XJ2024021）
