来源:期刊VIP网 时间:
作者:岳佳颖;魏书宇;陶明阳;刘渴欣;王北艳;于立权;马金柱;宋佰芬;
单位:黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院;中国农业大学动物医学院;
摘要:为探究沙门菌(Salmonella)外膜蛋白PgtE的免疫原性,首先通过PCR方法扩增pgte基因并克隆于原核表达载体pET28a上,测序及酶切验证后转入大肠杆菌BL21中诱导表达,利用His亲和标签获得纯化的PgtE蛋白;然后将PgtE与葡萄糖酸锰(Mn~(2+))及氢氧化铝(AH)佐剂混合制备免疫原,该蛋白以每只50μg的剂量免疫小鼠,通过细胞增殖检测、ELISA以及细菌负载试验评估其免疫效果。结果显示,与对照组相比,PgtE+Mn~(2+)+AH组小鼠的脾淋巴细胞增殖指数(SI)、血清中IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ以及Ig G水平显著升高(P<0.05),脾、肝和肾的沙门菌负载量显著减少(P<0.05),并且PgtE+Mn~(2+)+AH组与PgtE组小鼠的存活率分别为100%和77%,显著高于PBS对照组。综上所述,PgtE蛋白具有良好的免疫原性,且Mn~(2+)和氢氧化铝佐剂能显著增强PgtE蛋白引起小鼠的免疫反应,研究结果为沙门菌亚单位疫苗的研发提供了重要参考。
关键词:沙门菌;;PgtE;;原核表达;;免疫原性
基金资助:国家重点研发计划项目(2023YFD1802504)