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作者：黄国梁;王爽;张智慧;孙世琪;郭慧琛;蔺国珍;
单位：西北民族大学生命科学与工程学院;中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室;
摘要：为筛选提取牛血浆外泌体的高效方法，通过聚丙烯酰胺凝胶电泳、动态光散射分析仪、BCA蛋白浓度定量、透射电子显微镜观察及Western-blot等分析超速离心法、蔗糖垫超速离心法、蔗糖密度梯度离心法及免疫磁珠法4种方法提取的牛血浆外泌体形态、大小及标志蛋白的表达相关指数。结果表明：用超速离心法提取的外泌体浓度高但纯度低；用蔗糖密度梯度离心法提取的外泌体粒径大小、形态、纯度均比超速离心法高但浓度低；用30%蔗糖垫离心法提取的外泌体粒径大小、形态、纯度比前2种方法有不同程度的提高，浓度也较蔗糖密度梯度离心法高，同时外泌体的形态比前2种方法也更完整；用免疫磁珠法提取的外泌体粒径偏大。结论，使用30%蔗糖垫超速离心法提取外泌体的效果最好。
关键词：牛;;血浆外泌体;;提取;;超速离心;;免疫磁珠
基金资助：国家重点研发计划项目（2023YFD1802501）;; 中央高校基本科研业务费专项资金项目（31920240097）;; 国家自然科学基金项目（32473012,32301127）;; 兰州市青年科技人才创新项目（2024-QN-3）;; 甘肃省自然科学基金项目（25JRRA442,24JRRA012）;; 企业横向项目资金项目（GSYKL20201014-1）
