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作者：郭立明;范慧霞;王亚轩;张帅;赵云环;左玉柱;范京惠;
单位：河北农业大学动物医学院;河北农业大学信息科学与技术学院;
摘要：为构建稳定高效表达猪CD163受体的Marc-145细胞系，从而可以在体外高效地增殖PRRSV，通过PCR扩增猪CD163基因全长并构建其真核表达载体，然后转染至Marc-145细胞内，利用G418加压筛选以获得稳定高效表达猪CD163的Marc-145细胞系。用不同PRRSV毒株分别感染Marc-145细胞和Marc-145-CD163细胞，然后测定病毒滴度和病毒的相对复制水平。结果显示，成功扩增出了猪CD163基因全长并成功构建了重组表达载体pcDNA3.1-pCD163，通过G418加压、有限稀释法建立了稳定高效表达猪CD163的Marc-145细胞系。IFA和Western-blot结果显示，猪CD163受体蛋白可以在细胞系中稳定高效表达，且表达量高于Marc-145细胞。TCID_(50)和实时荧光定量PCR结果显示，PRRSV在Marc-145-CD163细胞上的滴度和复制水平较Marc-145细胞在一定程度上得到了提升。本试验为PRRSV在体外高效快速地增殖及其相关的研究奠定了一定基础。
关键词：PRRSV;;CD163;;稳定表达;;细胞系
基金资助：河北省现代农业产业技术体系生猪创新团队项目（HBCT2024220201,HBCT2024220401）
