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作者：鱼海琼;李娟;梁佳琪;李明;王国胜;王莹;陈芳;吴晓薇;曾潇;佟铁铸;魏俊;张璐;孙铭飞;苏飞雄;
单位：广州海关技术中心;广东省农业科学院动物卫生研究所农业农村部禽流感等家禽重大疫病防控重点实验室广东省畜禽疫病防治研究重点实验室;河源海关综合技术服务中心;广州海关;
摘要：为快速检测进出境马匹样品中马鼻疽和马鼻肺炎病原的核酸，选取两种病原保守基因片段，分别设计了适合的荧光定量PCR引物和探针，筛选和优化了试验最佳反应浓度和反应条件，建立了针对马鼻疽和马鼻肺炎病原核酸检测的双重荧光定量PCR(FQ-PCR)方法。结果显示，所建立的方法和体系能很好地区分马鼻疽、马鼻肺炎和其他马属动物疫病的病原核酸，检测马鼻疽和马鼻肺炎双重定量PCR标准曲线的相关系数分别为R~2=0.996 7和R~2=0.996 5,DNA含量最低检测限度分别为44.7 copies/μL和32.6 copies/μL。结果表明，本研究建立的方法具有较高的特异性、敏感性和可重复性。该方法可用于马匹疫病检测实验室快速检测，并能同时检测马鼻疽和马鼻肺炎两种病原核酸，具有重要的实际应用价值。
关键词：马鼻疽;;马鼻肺炎;;双重荧光定量PCR
基金资助：农业农村部禽流感等家禽重大疫病防控重点实验室/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室开放课题（YDWS202401）;; 海关总署科研项目（2024HK253,2025HK048）
