来源：期刊VIP网 时间：
作者：张亚岭;王振蕊;景伟;苏洋;陈国华;何小兵;房永祥;李小明;景志忠;曾巧英;
单位：甘肃农业大学动物医学院;中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室;中农威特生物科技股份有限公司;
摘要：本研究通过生物信息学分析对MPXVgp085蛋白的理化性质、结构、抗原表位等进行预测分析，表达gp085重组蛋白并纯化，制备和分析家兔源多克隆抗体。以MPXV gp085基因为研究对象，应用在线网站对其进行生物信息学分析。采用原核表达系统表达gp085重组蛋白，纯化后通过SDS-PAGE对纯化效果进行验证。将纯化后的gp085蛋白免疫家兔制备多克隆抗体，通过间接ELISA测定抗体效价，通过Western-blot检测多克隆抗体特异性。生物信息学分析表明，MPXV gp085蛋白为稳定性亲水蛋白，无跨膜区和信号肽，有3个线性表位；在9种正痘病毒中，对应MPXV gp085的同源基因序列一致性高，其中与牛痘病毒的亲缘关系最近。MPXV gp085重组蛋白主要以包涵体形式表达，大小约为17 k Da。间接ELISA检测结果显示其多克隆抗体效价达1∶51 200,Western-blot结果表明其多克隆抗体能够特异性识别gp085蛋白。MPXV gp085重组蛋白具有较好的抗原性，免疫家兔后能刺激产生高滴度的抗体，这为进一步研究MPXV gp085蛋白的生物学功能以及快速诊断技术的开发提供生物材料和理论依据。
关键词：猴痘病毒;;gp085蛋白;;生物信息学分析;;原核表达;;多克隆抗体
基金资助：国家自然科学基金面上项目(32473069);; “十四五”国家重点研发计划项目(2023YFD1802501);; 兰州市科技计划项目(2023-1-38);; 甘肃省科技重大专项(23ZDNA007);; 国家动物疫情监测与防治专项(125161031);; 甘肃省青年科技基金项目(22JR5RA780)
