来源：期刊VIP网 时间：
作者：马志雅;李婷婷;李文硕;王萌;朱兴全;张念章;
单位：中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室;山西农业大学动物医学学院;
摘要：为探究弓形虫含主要协同转运蛋白超家族（MFS）结构域蛋白TGME49＿226020的基本生物学功能，利用CRISPR-Cas9技术结合生长素诱导的降解系统（m AID）分别构建弓形虫RH-TIR1和Pru-TIR1野生株的条件性缺失虫株RH-TIR1-TGME49＿226020-m AID和Pru-TIR1-TGME49＿226020-m AID。间接免疫荧光试验结果显示，TGME49＿226020蛋白定位于细胞质，加入吲哚乙酸（IAA）后目的蛋白被成功降解。将IAA加入RH-TIR1-TGME49＿226020-m AID虫株的培养基中，与RH-TIR1野生株相比，条件性缺失虫株感染宿主细胞后噬斑减小（P<0.000 1）、入侵能力减弱（P<0.001）、细胞内复制能力减弱（P<0.001），但对逸出能力和弓形虫体内各细胞器的稳定性无影响。缓殖子转化试验结果显示，加入IAA降解后，RH-TIR1-TGME49＿226020-m AID虫株和Pru-TIR1-TGME49＿226020-m AID虫株的转化能力与相应野生株相比均显著减弱（P<0.001）。结论：TGME49＿226020为含MFS结构域的转运蛋白，降解后可影响弓形虫体外细胞内的正常生命活动，具体作用机制需进一步探究。
关键词：弓形虫;;条件性缺失;;MFS结构域;;生长素诱导降解系统
基金资助：西藏自治区科技计划项目（QYXTZX-RKZ2024-03-3）;; 山西农业大学高层次人才科研专项（2021XG001）;; 甘肃省科技重大专项计划项目（23ZDNA007）;; 兰州市科技计划项目（2025-2-97）
