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作者：黄欣;田钗;徐泰然;李湘萍;
单位：广西大学,广西畜禽繁育与疾病防控重点实验室;
摘要：卵母细胞体外成熟（IVM）是动物胚胎生物技术的重要环节，已被广泛应用于家畜体外受精、核移植和转基因动物技术等方面。大量研究发现，体外培养过程中产生的活性氧（ROS）累积可能会造成卵母细胞的氧化应激、成熟阻滞和减数分裂异常，导致受精或激活后胚胎发育停滞、胚胎死亡等现象。枸杞多糖（LBP）作为枸杞提取物的活性成分，具有抗氧化、抗衰老、消炎等功效，已被证实可以降低玻璃化冷冻小鼠卵母细胞的ROS含量。为了解LBP是否可以降低体外成熟卵母细胞的氧化应激并通过Keap1-Nrf2-ARE信号通路发挥作用，通过在猪卵母细胞体外成熟过程中加入LBP和Nrf2特异性抑制剂Brusatol的方法，探讨枸杞多糖对卵母细胞体外成熟的影响，及对Nrf2信号通路和过氧化物酶体的作用。结果显示，与未处理组相比，成熟培养液中添加100μg/m L的LBP可以显著提高卵母细胞第一极体排出率、IVF胚胎的分裂率、4-细胞率和囊胚率（P<0.05）。卵母细胞的ROS含量显著降低、GSH-Px酶活性显著提高（P<0.05），抗氧化相关基因CAT、SOD1、GPX4和细胞凋亡相关Bcl2表达水平显著上调，BAX表达水平显著下调（P<0.05）。与未处理组相比，4 nmol/L Brusatol处理显著降低猪卵母细胞第一极体排出率、IVF胚胎的分裂率、4-细胞率、囊胚率（P<0.05）。LBP单独处理及与Brusatol联合处理显著提高了猪卵母细胞Nrf2基因表达（P<0.05）,RT-qPCR结果显示，LBP处理显著提高了Nrf2以及过氧化物酶体活性相关基因PEX3、PEX5、PEX19、PHYH、PPARγ的表达（P<0.05）。以上结果表明，添加适宜质量浓度LBP能提高猪卵母细胞体外成熟效率和早期胚胎发育潜力，其可能通过激活Nrf2信号通路及增强过氧化物酶体活性来发挥作用。
关键词：猪卵母细胞;;氧化应激;;枸杞多糖;;Nrf2
基金资助：国家自然科学基金项目（32460833）;; 广西自然科学基金项目（2025GXNSFAA069011）;; 2025湖北省脐带血造血干细胞治疗临床医学研究中心开放课题
