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作者：刘心缘;陈丽霞;叶林特;武力;
单位：华南农业大学兽医学院;广东华农高科生物药业有限公司;
摘要：一只雄性英国短毛猫，就诊前出现体温升高、打喷嚏、口腔溃疡、眼鼻分泌物增多等症状，疑似猫杯状病毒(Feline calicivirus, FCV)感染。为了探究患猫感染的病原及其遗传进化特征和致病性，试验采集患猫的口鼻咽拭子样本，首先采用RT-PCR方法检测FCV核酸，然后接种F81细胞对病毒进行分离、培养与纯化，采用间接免疫荧光试验进一步对病毒进行鉴定，随后通过全基因组测序分析分离毒株的遗传进化特征，最后进行致病性试验。结果表明：病料经RT-PCR检测为FCV核酸阳性，接种F81细胞24 h内细胞出现明显病变；在以鼠抗FCV单克隆抗体FCV1-43为一抗、山羊抗小鼠IgG H&L为二抗的间接免疫荧光试验中，接种病毒的细胞病变部分出现明显的绿色荧光信号，而正常细胞无绿色荧光信号存在；将分离的毒株命名为FS22-1。FS22-1分离株基因组全长为7 706 bp;与FCV各参考毒株全基因组序列相似性在76.1%～80.4%之间，其中与GXNN06-20株的相似性最高(80.4%),与GD株的相似性最低(76.1%),与国内外5株疫苗株(F9、FCV 2024、F4、FCV-225、F65)均属于基因Ⅰ型，但相似性较低(在77.4%～78.9%之间);FS22-1分离株ORF2编码蛋白E区5′端和3′端高变区与国内常用疫苗株FCV-225之间存在大量氨基酸突变位点，其中在B细胞表位存在8个氨基酸突变位点，但在E区中心区域(475～479 aa)的B细胞表位未发生位点突变；仅有2个氨基酸突变位点(448K/R、452E)符合强毒株特征(包括438V、440Q、448K/R、452E、455T、465S和492V)。感染FS22-1分离株的4只试验猫均出现体温升高、打喷嚏、眼鼻分泌物增多、短暂性跛行和口腔溃疡等与感染FCV经典毒株相同的临床症状，发病潜伏期为1～2 d,感染第5～7天为排毒高峰期，发病率为100%;其中有1只试验猫于攻毒后第11天死亡，其肺脏组织病理切片可见肺泡壁间隔增厚，有少量炎症细胞浸润，肺泡腔内可见大量红细胞渗出，细支气管内上皮细胞脱落以及红色血栓形成。说明患猫感染了FCV,该毒株与国内外5株疫苗株F9、FCV 2024、F4、FCV-225、F65亲缘关系较远，且具有一定的致病性。
关键词：猫杯状病毒;;分离;;鉴定;;全基因组;;遗传进化分析;;致病性
基金资助：广州市科技计划——民生科技项目(202002020056)
