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作者:樊晓慧;王燕;张凌;马万鹏;阿斯也木亚森;佟盼盼;苏战强;
单位:新疆农业大学动物医学学院;草食动物新药研究与创制重点实验室;沙雅县红旗镇畜牧兽医站;
摘要:为了解新疆和田地区(A场)和喀什地区(B场)两个规模化养鸽场病死鸽沙门菌感染情况及其耐药性和毒力,试验从A、B场中无菌采集病死鸽内脏(肝脏、脾脏、肾脏)组织共521份,采用常规方法对沙门菌进行分离与培养,并进行革兰氏染色与镜检、生化鉴定、PCR鉴定、血清型鉴定、耐药性分析、耐药基因检测、毒力基因检测,再选取携带毒力基因种类最多的分离菌株进行小鼠致病性试验。结果表明:从两个养鸽场病死鸽内脏中共分离到16株沙门菌,总分离率为3.07%(16/521),其中A场分离率为2.53%(9/356),B场分离率为4.24%(7/165)。16株沙门菌在SS琼脂培养基上培养18 h均可见边缘半透明状、中心呈黑色的菌落,在HE琼脂培养基上培养18 h均可见边缘整齐、中心呈黑色的菌落,革兰氏染色与镜检均可见革兰氏阴性短杆菌,生化鉴定结果均符合沙门菌特征;PCR鉴定结果均符合invA基因的预期大小(605 bp),分别命名为菌株1~16。16株沙门菌的鼠伤寒沙门菌TMP2和TMP3基因PCR扩增结果均为阳性,其他血清型基因的PCR扩增结果均为阴性。16株沙门菌对苯唑西林、克林霉素耐药率最高,为100%;对青霉素、万古霉素、红霉素的耐药率较高,在62.50%~87.50%之间;对氨苄西林、阿莫西林、头孢他啶、头孢唑啉、链霉素、四环素、米诺环素、氯霉素和复方新诺明耐药率较低,在6.25%~50.00%之间;对头孢吡肟、庆大霉素、阿米卡星、左氧氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星耐药率为0。16株沙门菌tetA基因的携带率为50.00%,bla_(CTX-M)基因的携带率为25.00%,bla_(CTX-M-2)基因的携带率为12.50%,tetG、aac、tetE基因的携带率均为6.25%,其他耐药基因携带率均为0。16株沙门菌spvR基因、sopB基因、prgH基因、lpfC基因、filmA基因、misL基因、spvB基因的携带率分别为62.50%、56.25%、31.25%、18.75%、18.75%、12.50%和6.25%,其他毒力基因携带率均为0。小鼠腹腔注射1×10~3,1×10~5,1×10~7,1×10~9,1×10~(11) cfu/mL菌液后均出现精神萎靡、食欲不振、腹泻等临床症状,并分别于3 d、3 d、4 d、7 d和7 d内全部死亡。攻毒后的小鼠心外膜局部轻度增厚,心肌细胞断裂、炎症细胞浸润或纤维化;肺泡壁增厚、血管坏死、血栓形成及出血;肝细胞片状坏死,静脉及肝窦淤血扩张;肾小管上皮坏死、水样变性及髓质间质淤血;脾脏内白髓和红髓坏死、淤血及少量粒细胞浸润。说明两个规模化养鸽场病死鸽存在沙门菌感染情况;优势血清型为鼠伤寒沙门菌;分离到的16株沙门菌对头孢吡肟、庆大霉素、阿米卡星、左氧氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星敏感,携带多种耐药基因和毒力基因。
关键词:鸽;;沙门菌;;血清型;;耐药性;;耐药基因;;毒力基因;;致病性
基金资助:新疆维吾尔自治区重点研发家禽产业技术体系项目(XJARS-12-04);; 新疆维吾尔自治区重点研发项目“新疆特色鸽品种培育及配套关键技术研发与推广”(2023B02036-2-3);; 新疆维吾尔自治区重大科技专项“特禽常见多发病防控关键技术研究”(2023A02007-3)