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作者：徐飞;温贵兰;孙芸;罗东还;赵静;
单位：贵州大学动物科学学院;
摘要：为了确定贵州省某乌骨鸡养殖场病鸡发生肿瘤性疾病的病原，试验首先采集病鸡的心脏、肝脏、脾脏和肾脏等组织样本，采用PCR/RT-PCR方法对禽肿瘤性疾病病原[马立克病毒(Marek’s disease virus, MDV)、禽网状内皮增生病毒(Reticuloendotheliosis virus, REV)和禽白血病病毒(Avian leukosis virus, ALV)-A、ALV-J、ALV-K]核酸进行检测，然后根据核酸检测结果对病毒进行分离培养、ELISA检测和间接免疫荧光鉴定(以鼠抗ALV p27多克隆抗体为一抗、Alexa Fluor标记山羊抗小鼠IgG为二抗),最后对分离株gp85基因核苷酸序列进行分析。结果表明：组织样本仅ALV-J核酸检测结果为阳性，而MDV、REV、ALV-A、ALV-K核酸检测结果均为阴性；分离株经ELISA检测呈ALV p27抗原阳性；在间接免疫荧光试验中，接种病毒液的DF-1细胞胞浆中出现红色荧光，而细胞对照无红色荧光，将分离株命名为GZ23ZY01J。GZ23ZY01J分离株gp85基因与ALV-J参考株的核苷酸序列相似性在95.2%～99.9%之间，其中与我国广西分离株GX14YYA1的相似性最高，为99.9%;与其他亚群参考株的核苷酸序列相似性在38.3%～41.6%之间。GZ23ZY01J分离株位于系统进化树J亚群所在大分支中。说明引起该养殖场乌骨鸡肿瘤性疾病的病原是ALV-J,分离株与广西分离株GX14YYA1高度同源。
关键词：乌骨鸡;;禽白血病病毒;;分离;;鉴定;;gp85基因;;克隆;;测序;;遗传进化分析
基金资助：2021年度贵州省科技支撑计划项目“贵州生态养殖鸡五种常发疫病防控技术研究与示范”(黔科合支撑[2021]一般164);; 2020年贵州省高等学校教学内容和课程体系改革项目(GZJG20200035)
