来源:期刊VIP网 时间:
作者:郑菲菲;何鑫;尹丽;张靖悦;祝东梅;高坚;宋玉峰;赵玉华;
单位:华中农业大学水产学院;水产养殖国家级实验教学示范中心(华中农业大学);
摘要:试验旨在从人工养殖的黄鳝体内分离高产蛋白酶菌株,为后续微生物蛋白酶的制备和微生态制剂的开发提供菌种资源,以解决黄鳝摄食率低、消化不完全及水体氮污染等问题。通过采用脱脂奶粉培养基透明圈法初筛和Folin-酚法测定酶活复筛相结合的方式筛选人工养殖黄鳝肠道中的高产蛋白酶菌株,通过溶血试验与药敏试验检测菌株安全性,并进行常规生化和分子生物学鉴定。通过单因素和正交试验优化其发酵条件,筛选到一株高产蛋白酶、产过氧化氢酶的菌株Ma-4,初步鉴定其为阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)。该菌株最适产酶条件为发酵时间48 h、发酵温度36℃、可溶性淀粉添加量15 g/L、牛肉浸粉添加量15 g/L和pH值6.0。优化后菌株酶活力为288.14 U/mL,较优化前提高了3.34倍。研究表明,菌株Ma-4为高产蛋白酶、产过氧化氢酶、不溶血、不耐药的阿氏芽孢杆菌,该菌株为开发黄鳝微生态制剂开拓了菌种资源。
关键词:黄鳝;;阿氏芽孢杆菌;;筛选鉴定;;安全性评价;;发酵条件优化
基金资助:国家自然科学基金面上项目(项目编号:32273156);; 湖北省大学生创新创业训练计划项目(项目编号:S202110504216)