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作者：王楠;张紫薇;周静;卞勇;薛梅;
单位：南京中医药大学中西医结合学院;四川省中医药科学院;南京中医药大学实验动物中心;
摘要：目的:探讨当归补血汤通过单磷酸腺苷激活的蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(AMPK/mTOR)通路调控人肾足细胞自噬的机制。方法:人肾足细胞分为空白对照组、模型对照组、高糖+正常对照血清组、高糖+10%当归补血汤含药血清组。UPLC-PDA分析当归补血汤的主要成分；CCK-8法检测各组细胞的增殖情况；透射电镜法观察细胞的自噬改变；qRT-PCR法检测自噬相关因子mRNA的表达；采用Wertern blot法检测AMPK/mTOR通路及自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的表达。结果:咖啡酸、阿魏酸、芒柄花黄素、毛蕊异黄酮和藁本内酯这五种当归补血汤主要成分同时被检出；当归补血汤含药血清能有效改善细胞活力，减少高糖条件下的人肾足细胞自噬小体、自噬溶酶体和隔离膜的数量；与正常对照血清组相比，当归补血汤含药血清组能够促进高糖条件下自噬相关因子Beclin1、Ulk 1、Lc3-Ⅱ/Lc3-Ⅰ、Ampk的mRNA表达，下调P62的mRNA表达(P<0.05),能够上调p-AMPK/AMPK和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达上调，下调p-mTOR/mTOR蛋白的表达(P<0.05)。结论:当归补血汤对高糖条件下人肾足细胞具有保护作用，机制是通过AMPK/mTOR信号通路激活下游细胞自噬而实现。
关键词：当归补血汤;;单磷酸腺苷激活的蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白;;人肾足细胞;;自噬
基金资助：2024年江苏省研究生科研创新计划项目(编号：KYCX24＿2330);; 国家自然科学基金青年科学基金项目(编号：81904085);; 国家中医药管理局高水平中医药重点学科建设项目(编号：GSPZDXK-FJXYB003)
