来源：期刊VIP网 时间：
作者：李慧;李德文;姚春;安晓霞;张冰玉;唐曦平;陈国忠;
单位：广西中医药大学;广西中医药防治医学分子生物重点实验室;防城港市中医医院;广西中医药大学第一附属医院;广西医科大学附属肿瘤医院;
摘要：目的：考察清解化攻方调控PINK1/Parkin介导的线粒体自噬调节重症急性胰腺炎肠损伤的作用机制。方法：SD雄性大鼠随机分为正常对照组、模型组、清解化攻方组、清解化攻方+CCCP(线粒体自噬激活剂)组、Mdivi-1(线粒体自噬抑制剂)组，采用5%牛磺胆酸钠逆行胰胆管建立重症急性胰腺炎肠损伤模型，造模成功后各给药组分别给予相应药物，正常对照组和模型组灌胃相应体积生理盐水，给药24 h后ELISA检测大鼠血清脂肪酶、淀粉酶、回肠组织匀浆中TNF-α、IL-6含量；HE染色观察大鼠胰腺、回肠组织病理学改变；比色法检测回肠组织匀浆液ATP含量；透射电镜观察大鼠回肠组织线粒体超微结构；免疫荧光染色观察回肠组织LC3B、TOMM20免疫共定位；Real-time PCR和Western Blot检测大鼠回肠组织PINK1、Parkin、LC3、TNF-α、IL-6 mRNA及蛋白表达。结果：与正常对照组比较，模型组大鼠胰腺和回肠组织结构紊乱、伴大量炎性细胞浸润，病理损伤严重；血清淀粉酶、脂肪酶及回肠组织匀浆TNF-α、IL-6含量显著升高，回肠组织匀浆ATP含量显著降低(P<0.05);肠组织透射电镜可见大部分线粒体形状模糊、扩张、空泡、溶解，线粒体数量减少，可见大量自噬小体；免疫荧光LC3B与TOMM20的双重标记显著升高；PINK1、Parkin、LC3Ⅱ/Ⅰ、TNF-α、IL-6 mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.05)。与模型组比较，清解化攻方组与Mdivi-1组胰腺和回肠组织病理损伤改善；血清淀粉酶、脂肪酶及回肠组织匀浆TNF-α、IL-6水平显著降低，回肠组织ATP水平显著升高(P<0.05);回肠组织透射电镜可见正常线粒体数量升高，大部分线粒体形态和结构基本完整，仍有少部分线粒体肿胀，线粒体融合分裂较少，可见少量自噬体；免疫荧光LC3B与TOMM20的双重标记显著减少，回肠组织PINK1、Parkin、LC3、TNF-α、IL-6 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05)。清解化攻方组各指标与Mdivi-1组比较差异无统计学意义(P>0.05)。清解化攻方+CCCP组各指标与模型组差异无统计学意义(P>0.05)。结论：清解化攻方可能通过抑制线粒体自噬过度激活减轻重症急性胰腺炎肠道炎症损伤。
关键词：重症急性胰腺炎肠损伤;;清解化攻方;;线粒体自噬;;PINK1/Parkin通路;;肠道炎症反应
基金资助：高水平中医药重点学科建设项目-中医内科学(zyyzdxk-2024016-01-01);; 国家自然科学基金项目(8216150526);; 广西中医药大学研究生教育创新计划项目(YCBXJ2023013);广西中医药大学“桂派中医药传承创新团队”A类资助项目(2022A001);; 广西自然科学基金面上项目(2020GXNSFAA297062);; 国家中医优势专科建设(2024010)
