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作者:陈锦桃;杨西晓;何杜朋;崔旭兰;芦娟;张荣;杨蕾;
单位:广州中医药大学;南方医科大学深圳医院;
摘要:目的:研究补阳还五汤含药血清对脂多糖(LPS)诱导下BV-2小胶质细胞神经炎症的调控作用和潜在的分子机制。方法:SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组和补阳还五汤组,分别灌胃双蒸水和补阳还五汤水提液,取血制备空白血清及补阳还五汤含药血清。建立LPS诱导的BV-2神经炎症模型,设置空白血清组、模型组、补阳还五汤含药血清(1%、2.5%、5%)组、5%补阳还五汤含药血清+GW9662(PPARγ抑制剂,10 nmol/L)组。采用试剂盒检测各组细胞的NO生成和iNOS活性。采用Elisa法检测细胞培养上清中TNF-α、IL-1β、IL-10含量,采用qPCR法检测TNF-α、IL-1β、IL-10、iNOS、CD32、CD206、Arg-1、PPARγ mRNA表达。采用免疫荧光和Western Blot检测iNOS、Arg-1、PPARγ蛋白表达。结果:与模型组比较,补阳还五汤含药血清能显著降低LPS作用下BV-2细胞NO生成、iNOS活性和培养上清中TNF-α、IL-1β水平,显著升高培养上清中IL-10水平,显著降低细胞中TNF-α、IL-1β、CD32、iNOS mRNA及iNOS蛋白表达,显著升高细胞中IL-10、CD206、Arg-1、PPARγ mRNA及Arg-1、PPARγ蛋白表达(P<0.01)。GW9662能显著抑制补阳还五汤含药血清对细胞IL-10水平和IL-10、Arg-1 mRNA及Arg-1蛋白表达的上调作用(P<0.01)。结论:补阳还五汤含药血清能促进BV-2小胶质细胞的M2亚型转化,减轻LPS诱导的神经炎症;其机制与上调PPARγ活性有关。
关键词:补阳还五汤;;含药血清;;小胶质细胞;;神经炎症;;表型极化;;PPARγ
基金资助:深圳市宝安区医疗卫生科研项目(2023JD111);; 鹏城岐黄工程深圳市中药特色技术传承人才培训项目(2023-2025年);; 广东省中医药管理局项目(20221274);; 广东省教育厅重点项目(2018KZDXM020)