来源：期刊VIP网 时间：
作者：贺艳艳;郭慧琛;孙世琪;穆素雨;敬晓棋;
单位：榆林学院生命科学学院;中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室;
摘要：为探讨可溶性猪CD40L（第113—261位氨基酸）对猪外周血单核细胞（PBMC）的活化作用，将构建好的含猪CD40L基因的质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中表达，纯化的重组CD40L蛋白偶联FITC后与PBMC进行原位杂交，同时使用荧光显微镜和流式细胞仪分析研究CD40L蛋白刺激B细胞的生物学活性。SDS-PAGE和Western-blot结果显示，表达的重组CD40L蛋白大小约14 k Da，确定最佳表达条件为16℃、D600 nm值为1.1、0.5 mmol/L IPTG诱导12 h；流式细胞仪分析表明，重组CD40L蛋白能与PBMC表面的CD40蛋白分子结合，重组CD40L蛋白可以明显活化B细胞（P<0.001）。结论：CD40L具有促进B细胞活化的生物学活性，CD40L能促进免疫细胞反应，具有免疫调节作用。本研究为CD40L在重要家畜物种和人类疾病动物模型中的作用奠定了基础。
关键词：猪CD40L;;原核表达;;生物学活性
基金资助：国家成都农业科技中心地方财政专项（NASC2024KR06）;; 兰州市人才创业创新项目（2023-RC-3）
