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作者：张自富;赵瑜;胡静;秦清明;麻冰洁;赵聘;陈思睿;赵云焕;
单位：信阳农林学院动物科技学院;中国农业大学动物科技学院畜禽育种国家工程实验室;
摘要：由于禽类独特的生殖生理特点和胚胎发育的复杂性，笔者利用慢病毒载体与鸡胚血管显微注射法相结合，以期探寻出一种简便、有效的制备转基因鸡的方法。对发育至第14～15期鸡胚，于卵黄外周静脉血管显微注射1μL病毒滴度为1×109TU/m L携带由人源性泛素启动子C调控的eGFP慢病毒，试验共操作了76枚胚胎，出雏44只，孵化率为57.9%(44/76)。结果显示，经检测，在G0代雏鸡的喙部、眼部、羽毛、大脑、胸肌、肺、腺胃、肠、脾、肝、心脏、肾中均观测到绿色荧光蛋白广泛性表达；在随机抽检G0代7只小鸡的性腺中，均观测到绿色荧光蛋白超强表达100%(7/7)；对发育到性成熟期的母鸡和公鸡随机抽样解剖，观测到睾丸和卵巢的卵泡中绿色荧光蛋白广泛性表达；对G1代60只雏鸡经PCR检测发现14只为阳性，阳性率为23.3%(14/60),Southern-blot检测结果进一步证实为阳性。结果表明，利用该方法成功生产出转基因鸡，为家禽基因组编辑创立了一种方便快捷、高效稳定的新方法。
关键词：转基因鸡;;慢病毒载体;;显微注射;;绿色荧光蛋白
基金资助：河南省自然科学基金项目（182300410028）;; 信阳农林学院高水平科研孵化器建设基金项目（FCL202104）;; 大别山区家禽种质资源应用与健康养殖科技创新团队项目（XNKJTD-013）
