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作者：刘向男;梁译文;周思源;司钰琪;余靓;瞿文静;贺有缘;许素琪;熊武;邹晓玲;
单位：湖南中医药大学第一中医临床学院;湖南中医药大学;湖南中医药大学第一附属医院;
摘要：目的 探讨黄芪甲苷(astragalosideⅣ,AS-Ⅳ)对过氧化氢(H_2O_2)诱导损伤的人内皮祖细胞(endothelial progenitor cells, EPCs)向内皮细胞(endothelial cells, ECs)分化和成管能力的影响。方法 取外周血分离并培养待鉴定的细胞，通过观察细胞形态、4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)核染及FITC-UEA-I和Dil-AC-LDL双荧光联合染色法对培养的人EPCs进行鉴定。将鉴定成功的人EPCs用500μM H_2O_2模拟氧化应激环境预处理3 h后，随机分为实验组、模型组并设置正常组，实验组加入100 mg/L AS-Ⅳ培养48 h;模型组和正常组用等体积的PBS液处理培养48 h。采用免疫荧光技术检测CD31、vWF表达水平以检测人EPCs向ECs分化的能力，采用Matrigel体外成管实验检测细胞成管能力。结果 成功得到人EPCs。免疫荧光检测显示，与正常组相比，模型组CD31、vWF荧光强度显著降低(P<0.01);与模型组相比，实验组CD31、vWF荧光强度显著升高(P<0.01)。Matrigel体外成管实验显示，与正常组相比，模型组受损人EPCs向ECs分化后形成血管交叉点、血管总长度、血管分支长度较正常组明显降低(P<0.05);与模型组相比，实验组中受损人EPCs向ECs分化后血管总长度、血管分支长度明显增多(P<0.05),血管交叉点差异无统计学意义。结论 AS-Ⅳ可促进氧化应激损伤的人EPCs向ECs分化和成管，具有促进血管新生的潜能。
关键词：黄芪甲苷;;氧化应激;;内皮祖细胞;;内皮细胞;;成管实验
基金资助：国家自然科学基金面上项目(82374276);; 湖南省大学生创新训练项目(S202310541040);; 湖南省自然科学基金科卫联合项目(2021JJ70033);; 湖南省科技厅临床医疗技术创新引导项目(2021SK51412)
