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作者:王震;张娇娇;李真;黄偲崟;王文慧;张雪涛;曾倩兰;郭仙妮;崔帅;周美启;吴生兵;黄建洲;
单位:安徽中医药大学针灸推拿学院;亳州市华佗中医院;安徽中医药大学中医学院;亳州职业技术学院;安徽省中医药科学院针灸经络研究所;经脉脏腑相关安徽省重点实验室;新安医学教育部重点实验室;
摘要:目的:通过观察损毁基底外侧杏仁核前/后部(aBLA/pBLA)对电针心经改善急性心肌缺血(AMI)大鼠心脏效应指标及线粒体损伤指标的影响,探讨电针心经改善AMI的作用机制。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组、电针+损毁aBLA组、电针+损毁pBLA组,每组12只。结扎冠状动脉左前降支复制AMI模型,损毁组在造模前3 d脑立体定位注射海人藻酸进行核团损毁。各电针组术后第1天开始电针“神门”“通里”,每次30 min,每天1次,共3 d。心电图记录ST段位移值及低频/高频(LF/HF)比值变化;超声心动图评估心功能各项指标;TTC染色观察心脏梗死面积;HE和Masson染色观察心肌组织病理改变;透射电镜观察心肌细胞线粒体超微结构;流式细胞技术检测心肌细胞活性氧(ROS)表达;PCR法检测心肌组织线粒体融合蛋白2(Mfn2)、钙/钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ(CaMK Ⅱ)、动力相关蛋白1(Drp1)mRNA的表达;Western blot法检测心肌组织Mfn2、Drp1、磷酸化(p)-Drp1、CaMK Ⅱ、p-CaMK Ⅱ蛋白的表达。结果:与假手术组比较,模型组ST段位移值、LF/HF比值均显著升高(P<0.01);左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短指数(LVFS)降低(P<0.01),左室收缩末期内径(LVIDs)、左室舒张末期内径(LVIDd)升高(P<0.01),心肌梗死面积百分比升高(P<0.01);心肌细胞肿胀、破裂、坏死,心肌组织胶原沉积增多、纤维化明显;肌节紊乱,线粒体肿胀、嵴紊乱;心肌细胞ROS荧光强度增加(P<0.01),Drp1、CaMK ⅡmRNA表达增加(P<0.01),Mfn2 mRNA表达减少(P<0.01),p-Drp1、p-CaMK Ⅱ蛋白表达增加(P<0.01),Mfn2蛋白表达减少(P<0.01)。与模型组比较,电针组和电针+损毁aBLA组ST段位移值、LF/HF比值均降低(P<0.01,P<0.05),LVEF、LVFS升高(P<0.01),LVIDs、LVIDd降低(P<0.05,P<0.01),心肌梗死面积百分比降低(P<0.01);心肌细胞损伤及纤维化情况得到明显改善;心肌线粒体损伤减轻;心肌细胞ROS荧光强度降低(P<0.01),Drp1、CaMK ⅡmRNA表达减少(P<0.01),Mfn2 mRNA表达增加(P<0.01),p-Drp1、p-CaMK Ⅱ蛋白表达减少(P<0.01),Mfn2蛋白表达增加(P<0.01);电针+损毁pBLA组以上各指标无明显变化,电针组各指标均优于电针+损毁pBLA组(P<0.01,P<0.05)。结论:BLA参与电针心经改善大鼠AMI的机制可能与其降低内质网应激水平、改善心肌线粒体功能障碍,从而减轻心肌损伤有关。其中,与aBLA比较,损毁pBLA对电针疗效的影响显著。
关键词:急性心肌缺血;;电针;;基底外侧杏仁核;;线粒体;;氧化应激
基金资助:国家自然科学基金面上项目(No.82274303)