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作者：常博雅;陈龙;程燏航;金旭;任佳;王海军;
单位：山西中医药大学;
摘要：目的：探讨“秩边透水道”针法通过调控Janus激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路改善卵巢低反应（POR）小鼠卵巢功能的可能机制。方法：动情周期正常的C57BL/6雌性小鼠随机选取12只作为空白组，剩余小鼠采用雷公藤混悬液（50 mg·kg~(-1)·d~(-1)）灌胃制备POR模型，将造模成功的小鼠随机分为模型组、针刺组和抑制剂组，每组12只。针刺组小鼠给予“秩边透水道”针法干预，每次20 min；抑制剂组给予AG490抑制剂溶液（1 mg/kg）腹腔注射；两组均每日1次，连续干预2周。干预结束当日各组小鼠同时促排卵，腹腔注射促性腺释放激素，48 h后腹腔注射人绒毛膜促性腺激素，次日取材。每日观察小鼠一般情况；阴道涂片法观察小鼠动情周期；检测小鼠获卵数、卵巢湿重并计算卵巢指数；ELISA法检测小鼠血清中抗缪勒管激素（AMH）、促卵泡生成素（FSH）、雌二醇（E2）、促黄体生成激素（LH）的含量；HE染色观察小鼠卵巢组织形态；透射电镜观察卵巢超微结构；TUNEL染色检测卵巢组织中细胞凋亡水平；实时荧光定量PCR法检测卵巢组织JAK2、STAT3、细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)mRNA表达水平；Western blot法检测卵巢组织JAK2、磷酸化（p）-JAK2、STAT3、p-STAT3、SOCS3、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白的表达；免疫组织化学法检测卵巢组织JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3阳性表达。结果：与空白组比较，模型组小鼠动情周期紊乱率提高（P<0.01）；获卵数、卵巢湿重、卵巢指数均下降（P<0.01）；血清E2、AMH含量下降（P<0.01）,FSH、LH含量升高（P<0.01）；卵巢形态破坏，各级卵泡数量减少，闭锁卵泡增多，颗粒细胞排列松散；电镜下线粒体减少，线粒体肿胀皱缩，结构模糊，线粒体嵴消失；卵巢细胞凋亡率明显增高（P<0.01）；卵巢组织JAK2、STAT3 mRNA表达提高（P<0.01）,SOCS3 mRNA表达降低（P<0.01）;p-JAK2、p-STAT3、Bax蛋白相对表达量升高（P<0.01）,SOCS3、Bcl-2蛋白相对表达量降低（P<0.01）；卵巢组织p-JAK2和p-STAT3的阳性表达增加（P<0.01）。与模型组比较，针刺组和抑制剂组小鼠动情周期紊乱率降低（P<0.01），获卵数、卵巢湿重、卵巢指数均升高（P<0.01,P<0.05）；血清FSH、LH含量下降（P<0.01）,AMH、E2含量提高（P<0.01）；卵巢形态改善，闭锁卵泡减少，正常卵泡增多；电镜下线粒体增多，线粒体结构良好，形状及排列均有不同程度改善；卵巢细胞凋亡率减少（P<0.01）;JAK2、STAT3 mRNA表达降低（P<0.01）,SOCS3 mRNA表达提高（P<0.01）；卵巢组织p-JAK2、p-STAT3、Bax蛋白相对表达量降低（P<0.01）,SOCS3、Bcl-2蛋白相对表达量升高（P<0.01）；卵巢组织p-JAK2和p-STAT3的阳性表达降低（P<0.01）。结论：“秩边透水道”针法可改善卵巢功能，其内在机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路磷酸化有关。
关键词：秩边透水道;;卵巢低反应;;Janus激酶2/信号转导和转录激活因子3信号通路
基金资助：国家自然科学基金资助项目（No.82074549）;; 山西省中医药管理局基金项目（No.2023ZYYB048）;; 师怀堂新九针学术流派传承工作室项目（No.22020PY-LP-03）
