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作者：罗缘;赵春丽;晏合吕;周永强;柴艺汇;
单位：贵州中医药大学药学院;
摘要：目的：分离并鉴定苗药百两金内生真菌和探究其抑菌活性。方法：采用组织分离法和平板划线法对百两金根、茎、叶及果实的内生真菌进行分离和纯化，利用插片法对其进行形态学鉴定，结合ITS测序，使用MEGA 11软件进行比对分析得出其种属。内生真菌发酵培养后，抽取滤液，采用纸片扩散法对供试病原细菌(大肠杆菌、普通变形杆菌、金黄色葡萄球菌、粪肠杆菌)进行抑菌活性初筛；选取初筛中具有较好抑菌效果的真菌分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取后，回收溶剂浓缩，得浸膏，最后采用纸片扩散法复筛及倍比稀释法测出其具有抑菌活性提取物的最小抑菌浓度(MIC)。结果：分别从百两金中共分离鉴定出46株内生真菌，分别从根、茎、叶及果实中分离得到内生真菌4、13、23及6株。通过ITS序列分析分离的内生真菌分属于5纲10目10科11属，包括刺盘孢属17株，粪壳属4株，青霉属10株，间座壳属2株，座囊菌属2株，拟茎点霉4株，黑痣菌属1株，长蠕孢属1株，栓菌属1株，烟管菌属2株，德巴利酵母属1株，未确定种属1株。体外抑菌实验表明百两金内生真菌胶孢炭疽菌、皮落青霉菌、法布里德巴利酵母菌各有一株菌株抑菌效果显著，三株菌株发酵液萃取物的MIC为0.66～5.06 mg/mL。结论：百两金的内生真菌种类丰富，且存在具有抑菌活性的内生真菌，分别为胶孢炭疽菌、皮落青霉菌、法布里德巴利酵母菌，其发酵液的萃取物对大肠杆菌、普通变形杆菌、金黄色葡萄球菌、粪肠杆菌几种病原菌有不同程度的抑菌活性。
关键词：百两金;;内生真菌;;分离与鉴定;;抑菌活性
基金资助：贵州省科技厅基础研究计划资助项目(黔科合基础-ZK[2023]一般419,黔科合基础-ZK[2021]一般518)
