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作者：覃雅;雷明;李林轩;万凌云;韦树根;张占江;潘丽梅;
单位：广西壮族自治区药用植物园广西道地药材高品质形成与应用重点实验室/广西中药材良种繁育技术创新中心/国家中医药传承创新中心;广西壮族自治区药用植物园广西药用资源保护与遗传改良重点实验室/广西壮族自治区中药资源智慧创制工程研究中心;
摘要：目的：克隆积雪草八氢番茄红素脱氢酶(phytoene desaturase, PDS)基因，对其编码蛋白进行生物信息学以及基因表达模式分析，构建过表达载体。方法：从积雪草cDNA中克隆PDS基因，对其编码的蛋白进行理化性质、结构和进化关系等生物信息学分析，利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析CaPDS基因在积雪草不同组织中的表达情况。结果：CaPDS基因的CDS(Coding Sequence)序列为1 764 bp,编码587个氨基酸；蛋白质分子质量为65.30 kDa,理论等电点为6.58,属亲水性非跨膜蛋白。PDS基因在进化过程中具有明显的保守性，其蛋白的保守结构域为PLN02612,CaPDS蛋白与伞形科植物胡萝卜Daucus carota subsp.sativus、大猪草Heracleum sosnowskyi和短毛独活Heracleum moellendorffii的PDS蛋白具有较近的系统发育关系。CaPDS基因在积雪草叶片中的相对表达量最高。成功构建了过表达载体pCAMBIA 1301-CaPDS。结论：本研究成功获得了积雪草CaPDS基因，掌握了该基因编码蛋白的生物信息学特征，并构建了过表达体系。
关键词：积雪草;;PDS蛋白;;基因克隆;;基因表达分析;;过表达载体
基金资助：中央引导地方科技发展资金项目(桂科ZY24212031);; 广西自然科学基金项目(2023GXNSFAA026330);; 广西科技基地和人才专项(桂科AD22035026);; 广西壮族自治区卫生健康委员会重点(培育)实验室建设项目(ZJC2020003);; 广西岐黄学者培养项目(GXQH202402)
