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中药材2025年第10期:桑黄转录因子基因SbMYB1的克隆、表达及转化酵母抗胁迫分析

来源:期刊VIP网 时间:


作者:孙婷婷;刘瑞鹏;张林芳;杜鹏禹;李亚伟;邹莉;

单位:哈尔滨学院食品工程学院;东北林业大学林学院;黑龙江交通职业技术学院粮食工程系;

摘要:目的:对桑黄转录因子基因SbMYB1进行克隆、表达及转化酿酒酵母,并对转化酵母进行抗胁迫分析,为揭示桑黄转录因子基因SbMYB1的功能奠定基础。方法:克隆桑黄转录因子基因SbMYB1并进行生物信息学分析;采用实时荧光定量PCR检测基因表达模式;构建SbMYB1基因的过表达载体并遗传转化酵母,观察转化酵母在非生物胁迫处理后的生长状况。结果:桑黄SbMYB1基因全长2 211 bp,含有6个外显子和5个内含子,cDNA全长1 929 bp,编码642个氨基酸,不具有信号肽和跨膜结构,亚细胞定位于细胞核;系统进化分析表明,SbMYB1蛋白与地中海拟层孔菌Fomitiporia mediterranea亲缘关系较近;对启动子顺式元件的分析显示,SbMYB1包含与非生物胁迫响应的作用元件;qRT-PCR分析表明,SbMYB1基因对冷、热和重金属胁迫有不同程度的响应;过表达桑黄SbMYB1基因后提高了重组酵母对高温、重金属胁迫的耐受性。结论:成功克隆了桑黄SbMYB1基因,并发现该基因的表达在非生物胁迫下显著诱导。通过酵母异源表达实验,证实桑黄SbMYB1基因在逆境应答中具有潜在的重要功能。

关键词:桑黄;;MYB转录因子基因;;酵母;;载体构建;;非生物胁迫

基金资助:黑龙江省自然科学基金联合引导项目(LH2022C054)