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作者：吴祖贵;朱月;李俊毅;李聪聪;申震;董玮;郭英;
单位：云南中医药大学第三临床医学院/第三附属医院/昆明市中医医院骨科;河南省洛阳正骨医院骨科;浙江中医药大学第一附属医院骨科;
摘要：目的：观察益气续骨合剂含药血清对IL-1β诱导大鼠软骨细胞PINK1/Parkin信号通路介导自噬的作用。方法：制备益气续骨合剂含药血清，提取大鼠软骨细胞并鉴定，分为空白对照组、模型组、益气续骨合剂含药血清组、塞来昔布含药血清组，CCK-8法检测含药血清的最佳时效及量效关系，TUNEL法检测软骨细胞凋亡率，JC-1荧光探针观察软骨细胞线粒体膜电位变化，DCFH-DA荧光探针观察ROS荧光强度，生化试剂盒检测软骨细胞ATP、MDA水平，RT-qPCR和Western Blot检测PINK1、Parkin、p62、CollagenⅡ、Aggreacan mRNA和蛋白表达。结果：与空白对照组比较，模型组细胞活力显著降低，凋亡率、ROS显著升高，线粒体膜电位和MDA水平显著升高，ATP、GSH水平显著降低，PINK1、Parkin、CollagenⅡ、Aggreacan、p62 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较，益气续骨合剂含药血清组及塞来昔布含药血清组细胞活力显著升高，凋亡率、ROS水平显著降低，线粒体膜电位和MDA水平显著升高，ATP、GSH水平显著降低，PINK1、Parkin、CollagenⅡ、Aggreacan、p62 mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论：益气续骨合剂可能通过调控PINK1/Parkin信号通路介导软骨细胞线粒体自噬，发挥保护软骨细胞的作用。
关键词：益气续骨合剂;;膝骨关节炎;;线粒体自噬;;PINK1/Parkin信号通路
基金资助：国家自然科学基金项目(82360943);; 云南省科技厅项目-中医联合专项(202101AZ070001-170,202301AZ070001-094,202301AZ 070001-15);; 云南省基础研究专项(202501AU070167)
