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作者：安小芳;胡思敏;蔡一;肖博文;卫心茹;汪露;
单位：西南民族大学畜牧兽医学院;
摘要：为了开发安全稳定的口服免疫佐剂，本试验基于脂质体(Lips)载体，以卵清蛋白(OVA)为抗原模型，采用壳聚糖(CS)和海藻酸钠(SA)顺序修饰构建壳聚糖-海藻酸钠-脂质体包裹OVA复合纳米粒(SA-CS-OVA-Lips)，采用薄膜分散法制备SA-CS-OVA-Lips，对其微观形貌、包封率和体外缓释特性进行表征，系统评价其理化性质；通过溶血试验、CCK-8法细胞毒性试验和体内组织病理学分析综合评估其生物安全性；利用酶联免疫吸附试验(ELISA)定量分析免疫小鼠血清OVA特异性免疫球蛋白G(IgG)和黏膜分泌型免疫球蛋白A(sIgA)抗体浓度，并分析脾淋巴细胞增殖情况，全面评价其免疫效果。结果显示，SA-CS-OVA-Lips呈规整椭圆形结构，粒径大小为256 nm，包封率达85.3%，且在酸性环境(pH 3)中几乎不释放抗原OVA，于弱碱性环境(pH 8)中可持续缓释OVA，证实其具有pH响应特性；生物安全性评估结果显示，SA-CS-OVA-Lips具有良好的血液相容性(溶血率均<5%)和细胞相容性(细胞活力均> 95%)，在体内毒性评价试验中，小鼠各主要脏器未见明显病理变化；免疫效果评估结果显示，与OVA组和OVA-Lips组相比，免疫后第35天SA-CS-OVA-Lips组血清OVA特异性IgG抗体浓度极显著提升(P<0.001)，黏膜sIgA抗体浓度显著提升(P<0.05或P<0.01)，脾淋巴细胞增殖率极显著提高(P<0.001)，增殖率达141.72%。结果表明，Lips经SA-CS表面修饰后，兼具良好的载药性能和生物安全性，可凭借其pH响应特性实现对OVA抗原的靶向缓释，有效增强口服免疫效果。本试验结果为开发高效、安全的pH响应型口服疫苗佐剂提供了参考。
关键词：脂质体(Lips);;海藻酸钠(SA);;壳聚糖(CS);;卵清蛋白(OVA);;免疫效果
基金资助：国家自然科学基金青年科学基金（32402907）;; 西南民族大学中央高校基本科研业务费专项资金(ZYN2024056)
