来源：期刊VIP网 时间：
作者：李熙忠;范许许;朱兆宇;裴丹诗;王一卓;何路;任青峰;郑海学;李伟伟;郜原;
单位：甘肃农业大学生命科学与技术学院;中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室;河南农业大学动物医学院;
摘要：构建促红细胞生成素肝细胞受体A2(Erythropoietin-producing hepatocellular receptor A2,EphA2)基因敲除和过表达的BHK-21细胞系，探究其对口蹄疫病毒（FMDV）复制的影响。通过CRISPR/Cas9基因编辑技术构建Eph A2基因敲除的BHK-21细胞系，利用慢病毒感染构建Eph A2基因过表达的BHK-21细胞系。经嘌呤霉素筛选及单克隆挑取，成功获得稳定细胞系。随后，以野生型BHK-21细胞为对照，将FMDV分别感染上述细胞系，采用实时荧光定量PCR、蛋白质免疫印迹等方法分别检测病毒核酸和蛋白水平。结果表明，Eph A2基因敲除后，FMDV在BHK-21细胞中的复制显著受到抑制，病毒核酸和蛋白表达量明显降低；而Eph A2基因过表达时，FMDV复制增强。本研究揭示了Eph A2基因在FMDV复制过程中具有重要作用，为深入理解FMDV的感染机制及防控策略提供了理论依据。
关键词：CRISPR/Cas9;;EphA2;;口蹄疫病毒
基金资助：国家自然科学基金青年项目（32202781,32302857）;国家自然科学基金重点项目（32330107）;; 国家重点研发计划项目（2021YFD1800300）;; 中国博士后科学基金项目（2023M743830）;; 国家生猪产业技术体系项目（CARS-35,CARS-39-13）;; 国家生猪技术创新中心先导科技项目（NCTIP-XD/C03）;; 中国农业科学院创新计划项目（CAASCSLPDCP-2023002,CAAS-ASTIP-2023-LVRI）;; “十四五”广东省农业科
