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作者：郑琦懿;蒙丽舟;邓吉平;谭昱;袁安文;杨青;
单位：湖南农业大学动物医学院;
摘要：旨在探讨伪狂犬病病毒（PRV）体外感染对猪卵巢黄体细胞生长、凋亡及孕酮分泌的影响。通过胶原酶消化法获得猪卵巢黄体细胞并采用3β-HSD染色进行鉴定；分离的黄体细胞接种100 TCID_(50)PRV培养不同时间后，采用透射电子显微镜技术观察病毒粒子在细胞中的定位，并通过定量PCR检测PRV感染不同时间后其UL54基因在细胞中的表达；通过CCK-8检测PRV感染对细胞活力的影响；分别采用TUNEL染色和流式细胞术分析病毒对细胞凋亡的影响；通过化学发光法检测PRV感染对黄体细胞分泌孕酮的影响，并采用RT-q PCR检测孕酮合成相关基因表达的影响。结果显示，通过胶原酶消化法可分离获得高纯度的猪黄体细胞；PRV可感染黄体细胞，感染后引起黄体细胞的明显病变，细胞内可见大量未完成组装或成熟的病毒颗粒，PRV UL54基因在细胞中的表达随时间延长显著升高（P<0.05）;PRV感染抑制猪黄体细胞的活力（P<0.01），促进细胞的凋亡（P<0.05），下调黄体细胞中孕酮的水平（P<0.05）及3β-HSD m RNA的表达（P<0.05）。以上结果提示，PRV可感染猪黄体细胞并在细胞中复制，感染后诱导细胞凋亡，引起黄体细胞病变，降低细胞活力和孕酮的分泌。
关键词：伪狂犬病病毒;;黄体细胞;;细胞活力;;凋亡;;孕酮
基金资助：国家自然科学基金项目（31772819）;; 湖南省技术攻关“揭榜挂帅”项目（2021NK1030）
