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作者:刘蕾;段梦迪;李毅;孙世琪;郭慧琛;白满元;
单位:甘肃农业大学动物医学院;中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室;
摘要:为研发具有良好安全性和免疫原性的猫嵌杯状病毒(FCV)样颗粒疫苗,本研究构建了表达FCV衣壳蛋白VP1蛋白载体pSMA-FCV-VP1,经大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达,获得重组His-SUMO-VP1融合蛋白,然后在SUMO酶切组装液中切除His-SUMO标签组装获得FCV-VLPs。对获得的FCV-VLPs通过SDS-PAGE、Western-blot、纳米粒度仪以及透射电子显微镜等多种方法对其进行鉴定。结果表明,VP1条带符合预期目的条带大小(66 k Da),组装的VLPs粒径均一(30~40 nm),与FCV粒子大小一致。将FCV-VLPs免疫小鼠后,小鼠血清中FCV特异性抗体水平为1∶720,该病毒样颗粒能有效促进小鼠脾淋巴细胞增殖。本研究所制备的FCV-VLPs能诱发较强的免疫反应,为FCV病疫苗的研发奠定了良好的基础。
关键词:猫嵌杯状病毒;;病毒样颗粒;;免疫原性
基金资助:甘肃省科技重大专项(24ZDWA004,23ZDNA007);; 兰州市青年科技人才创新项目(2024-QN-3)