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作者:帅文娜;唐银保;郭子强;李佳乐;罗梦;曾一凡;李丽薇;周艳君;姜一峰;童武;李兆龙;杨倩;童光志;高飞;
单位:中国农业科学院上海兽医研究所;南京农业大学动物医学院;扬州大学江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;福建省农业科学院畜牧兽医研究所;上海市兽医生物技术重点实验室;
摘要:为获得能够有效预防猪繁殖与呼吸综合征和猪细小病毒(PPV)感染的重组活载体疫苗,利用猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)活疫苗的反向遗传操作平台,将PPV的保护性抗原蛋白VP2的基因插入PRRSV的结构蛋白与非结构蛋白之间,构建pPRRSV-PPV-VP2的全长感染性克隆,经过Marc-145细胞上的病毒拯救获得重组病毒rPRRSV-PPV-VP2,并比较其与亲本病毒的空斑形态学差异、遗传稳定性、病毒增殖动力学等,同时,将其免疫仔猪以评价其激发猪体免疫反应的效果。结果显示,PPV的VP2基因能够在重组病毒rPRRSV-PPV-VP2中稳定遗传并高效表达;用重组病毒rPRRSV-PPV-VP2免疫的仔猪临床表现正常、剖检与病理切片显示各组织器官无异常病理变化,表明该重组病毒对仔猪具有良好的安全性,同时,其能诱导仔猪同时产生抗PRRSV与PPV的特异性抗体,表明该重组病毒具有良好的免疫原性。检测免疫后第0、7、14、21、28、35天所有试验猪的血清样本,VP2蛋白抗体水平与N蛋白抗体水平均于免疫后第7天转为阳性,同时两种抗体水平分别于第21天与28天达到峰值。以上结果表明,rPRRSV-PPV-VP2是一种具有前瞻性的针对PRRSV与PPV的病毒活载体疫苗。
关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒;;猪细小病毒;;重组病毒;;活载体疫苗
基金资助:中国农业科学院科技创新工程项目(CAAS-CSLPDCP-202402);; 上海市兽医生物技术重点实验室开放基金项目(BD1500010);; 国家重点研发计划项目(2022YFD1800804,2021YFD1801401);; 国家自然科学基金项目(32373050,32072861)