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作者：付修龙;郑启铭;金映红;汪萍;王延;丁煜恭;刘姝悦;柳梦婕;李月;杜英英;朱启运;薛晶;夏俊;
单位：新疆农业大学动物医学学院;新疆维吾尔自治区畜牧科学院兽医研究所动物临床医学研究中心;农业农村部草食动物疫病防控重点实验室(省部共建);中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室;兰州大学动物医学与生物安全学院;
摘要：为探究新疆地区绵羊源溶血性曼氏杆菌（Mannheimia haemolytica）的生物学特性并筛选候选疫苗菌株，本试验收集新疆地区羊场病死绵羊肺、肝和心等组织样品，采用平板划线及液体培养基对组织样品中的细菌进行纯化分离培养，通过革兰染色镜检观察形态；并对分离菌株进行PCR鉴定、生化鉴定、药敏试验和动物致病性试验，及以BALB/c小鼠为动物模型，利用溶血性曼氏杆菌A1型和其他血清型对分离株灭活疫苗免疫的小鼠进行攻毒试验。结果表明，该绵羊源分离菌株为溶血性曼氏杆菌，在4～8 h细菌量呈指数增加，在9～12 h含菌量最高，其最佳生长条件为马丁肉汤培养基培养12 h；该分离菌株对头孢唑林、多黏菌素B、环丙沙星、四环素和氨苄西林等抗菌药物敏感；该菌株能够引起试验小鼠发病死亡。将分离株研制成添加不同佐剂的灭活疫苗，评估其免疫效果。结果表明，氢氧化铝佐剂灭活疫苗可以抵抗同血清型溶血性曼氏杆菌的攻击，保护率达到80%；对其他血清型的溶血性曼氏杆菌的攻击保护效果差，对A2型、A6型和未知型的保护率分别为20%、60%和0%。综上所述，从该羊场病死羔羊分离的菌株为溶血性曼氏杆菌A1型，具有强毒力性，对部分抗菌药物敏感。与无佐剂和弗氏佐剂制备的疫苗相比较，氢氧化铝佐剂更适用于制备溶血性曼氏杆菌-A1型单价疫苗。该分离菌株可用于溶血性曼氏杆菌病疫苗的制备，但对其他血清型的溶血性曼氏杆菌的攻击保护力较差，建议制备多价疫苗进行疫病防控。
关键词：溶血性曼氏杆菌;;生物学特性;;PCR鉴定;;免疫攻毒保护试验
基金资助：新疆维吾尔自治区重大科技专项（2023A02007）;; 新疆维吾尔自治区“天山英才”青年科技拔尖人才项目（2022T SYCCX0046）;; 新疆维吾尔自治区乡村振兴产业发展科技行动项目（2024NC036）;; 国家重点研发计划项目（2021YF D1600701-2）;; 新疆维吾尔自治区重点研发项目（2022B02056-2）;; 新疆维吾尔自治区科技援疆项目（2024E02022）
