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作者：李一;肖宇婷;马跃宇;李明;费东亮;马鸣潇;
单位：锦州医科大学畜牧兽医学院;锦州医科大学实验动物中心;
摘要：为了研究中蜂囊状幼虫病毒（Chinese sacbrood virus,CSBV）感染中华蜜蜂幼虫后体内MicroRNAs(miRNA)表达谱变化，探讨差异miRNAs(DEmiRNAs)在中蜂幼虫响应CSBV应答中的功能。本研究分别对感染CSBV24h和48h中蜂幼虫进行Illumina高通量测序，通过生物信息学软件分析DEmiRNAs及其靶基因，并进行GO功能注释和KEGG通路富集分析。通过RT-qPCR对测序结果进行验证。结果显示：对CSBV感染前后中蜂幼虫测序共筛选出140个已知miRNAs和预测到5个新miRNAs。其中，L24I组（CSBV感染24h幼虫）和L24H组（健康幼虫）对比发现18个DEmiRNAs，其中有12个表达上调，有6个表达下调；L48I组（CSBV感染48h幼虫）和L48H组（健康幼虫）筛选到47个DEmiRNAs，其中有30个表达上调，有17个表达下调。GO分析表明，部分DEmiRNAs及相关靶基因参与免疫系统过程和刺激反应等功能；KEGG通路分析显示，除涉及物质和能量代谢通路外，主要的免疫通路包括MAPK、溶酶体、Hippo、凋亡信号通路等。选取对蜜蜂调控具有重要作用和将要研究的8个miRNAs进行RT-qPCR验证结果表明，结果表明其表达水平与测序结果高度一致，表明测序准确可靠。通过本研究，不仅有助于我们深入认识CSBV感染中蜂幼虫过程中宿主miRNA变化情况，也为探究中华蜜蜂和CSBV相互作用时miRNA发挥的功能提供帮助。
关键词：CSBV;中华蜜蜂;幼虫;MicroRNA;测序
基金资助：国家自然科学基金（项目号：32172789）,题目：m6A修饰在中蜂囊状幼虫病毒复制及RNAi免疫调控中的作用与机制研究;国家自然科学基金（项目号：31772760）,题目：中华蜜蜂囊状幼虫病毒编码siRNA及其RNAi抑制因子在免疫保护中的作用; 辽宁省自然科学基金（项目号：2022-MS-385）,题目：CSBV非结构蛋白3C与宿主互作蛋白的筛选及其功能研究; 锦州医科大学横向课题（项目号：2022043）,题目：中国蜜蜂蜂群崩溃失调症流行情况调查研究~~
