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作者：薛娜娜;徐彩琪;石勇荣;张蕊;孟浅;
单位：安徽医科大学临床药理研究所,抗炎免疫药物教育部重点实验室,抗炎免疫药物安徽省协同创新中心;
摘要：目的 探究并优化新生小鼠大脑皮质星形胶质细胞体外原代培养方法，为星形胶质细胞的体外培养提供更优解。方法 为优化小鼠大脑皮质星形胶质细胞体外培养方法，取新生3 d的C57BL/6J小鼠大脑皮质组织，去除脑膜和血管，经胰酶消化后离心，加入高糖的杜氏改良Eagle培养基(DMEM)吹打形成细胞悬液。进一步通过差速贴壁法、十字交叉手摇法以及恒温振摇法进行纯化，将细胞分别以不同培养密度接种于多聚赖氨酸包被的培养瓶中，并通过形态学观察，免疫荧光染色等方法对星形胶质细胞进行纯度鉴定。结果 新生小鼠大脑皮质细胞以5×10~6个/瓶密度接种效果好，活性高；纯化过程中使用高糖DMEM培养基联合差速贴壁法、十字交叉手摇法及恒温振摇法，星形胶质细胞纯度可达99%。结论 成功建立并优化小鼠大脑皮质星形胶质细胞的原代培养方法。
关键词：星形胶质细胞;大脑皮质;原代培养;细胞纯化;胶质纤维酸性蛋白
基金资助：国家自然科学基金(编号：82101311); “早期接触科研”训练计划项目(编号：2022-ZQKY-67); 安徽医科大学校科研基金(编号：2020xkj014)
