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作者：江舜祥;涂彬;宋凯;何缓缓;陶辉;曹炜;
单位：安徽医科大学第二附属医院胸外科;安徽医科大学第二附属医院麻醉与围手术期医学科;
摘要：目的 探讨Wnt信号通路调控剂分泌型卷曲相关蛋白3(sFRP3)在小鼠心肌成纤维细胞（CFs）活化增殖中的作用。方法 购入1～3 d的小鼠乳鼠，行手术对心脏取材，消化后分离CFs进行培养。细胞贴壁生长后使用转化生长因子（TGF-β1）刺激构建CFs活化增殖模型；确认模型构建成功后分别向实验组和对照组细胞转染sFRP3过表达质粒和空载质粒24～48 h。通过Western blot、qRT-PCR的方法在分子层面对sFRP3、Periostin(POSTN)、Ⅰ型胶原（CollagenⅠ）和增殖细胞核抗原（PCNA）的表达进行检测；使用MTT法、CCK-8法和EdU染色法检测细胞增殖能力的改变。结果在TGF-β1刺激构建的CFs活化增殖模型中，相较于对照组，模型组sFRP3蛋白及mRNA表达下降，活化增殖相关蛋白PCNA、POSTN和CollagenⅠ表达上调。另外，在质粒转染sFRP3过表达组的CFs中，PCNA、POSTN和CollagenⅠ蛋白及mRNA表达相较于空载组下降。MTT、CCK-8与EdU实验表明，质粒转染sFRP3过表达组的CFs增殖活性较空载组明显下降。结论 过表达sFRP3明显抑制CFs活化增殖，提示sFRP3可能是参与调控CFs活化增殖的关键基因。
关键词：sFRP3;心肌成纤维细胞;心肌纤维化;活化;增殖
基金资助：安徽省重点研究与开发计划项目(编号：202104j0702-0037); 安徽省高校优秀青年科研项目(编号：2023AH-030116); 安徽高校自然科学研究项目(编号：KJ2021A0313)
