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作者：陈华;沙娜;刘宁;李阳;胡海军;
单位：暨南大学第二临床医学院南方科技大学第一附属医院广东省深圳市人民医院急诊外科;暨南大学第二临床医学院南方科技大学第一附属医院广东省深圳市人民医院胃肠外科;
摘要：目的：观察人骨髓间充质干细胞（hMSCs）条件培养基（CM）与人脂肪肉瘤SW872细胞共培养后对肿瘤细胞增殖和迁移能力的影响，探讨hMSCs CM对脂肪肉瘤细胞的作用及可能的作用机制。方法：体外培养hMSCs，采用慢病毒方法分别转染慢病毒空载体shNS （对照组）和慢病毒shRNAYes相关蛋白（YAP）(shYAP-hMSCs组)，采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western blotting法检测各组hMSCs中YAP mRNA和蛋白表达水平，提取CM。体外培养SW872细胞，分为对照组（正常培养）、hMSCs CM组和shYAP-hMSCs CM组。采用CCK-8法检测各组细胞增殖活性，流式细胞术检测各组细胞凋亡率，细胞划痕实验检测各组细胞划痕愈合率，Western blotting法检测各组细胞中YAP、基质金属蛋白酶9 (MMP-9)和细胞周期蛋白D1 (cyclin D1)蛋白表达水平。结果：与对照组比较，shYAP-hMSCs组hMSCs中YAP mRNA和蛋白表达水平降低（P<0.01），表明成功构建了shYAP-hMSCs稳定转染细胞株。CCK-8法，与对照组比较，hMSCs CM组SW872细胞增殖活性升高（P<0.05）,shYAP-hMSCs CM组SW872细胞增殖活性降低（P<0.01）；流式细胞术，与对照组比较，hMSCs CM组SW872细胞凋亡率无明显变化（P>0.05）,shYAP-hMSCs CM组SW872细胞凋亡率升高（P<0.01）；细胞划痕实验，与对照组比较，hMSCs CM组SW872细胞划痕愈合率升高（P<0.05）, shYAP-hMSCs CM组SW872细胞划痕愈合率降低（P<0.01）;Western blotting法，与对照组比较，hMSCs CM组SW872细胞中YAP、MMP-9和cyclin D1蛋白表达水平差异无统计学意义（P>0.05）,shYAP-hMSCs组SW872细胞中YAP、MMP-9和cyclin D1蛋白表达水平降低（P<0.05或P<0.01）。结论：hMSCs参与调控人脂肪肉瘤SW872细胞增殖和迁移，其机制可能与YAP表达有关。
关键词：骨髓间充质干细胞;;条件培养基;;脂肪肉瘤;;细胞增殖;;细胞迁移;;Yes相关蛋白
基金资助：广东省科技厅区域联合基金重点项目（2020B1515120043）;; 广东省深圳市科技创新委员会科技计划项目（JCYJ20190806152812751）
