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中药材2025年第01期:川续断DaAACT基因的克隆及表达分析

来源:期刊VIP网 时间:


作者:杨欢欢;徐娇;周涛;胡正平;胥春云;肖承鸿;

单位:贵州中医药大学中药民族药资源研究院;

摘要:目的:对川续断中川续断皂苷Ⅵ合成关键酶基因DaAACT进行克隆和表达分析,为进一步研究川续断皂苷Ⅵ合成机制奠定基础。方法:克隆川续断中DaAACT基因并进行生物信息学分析;分析DaAACT基因在川续断不同组织及低温诱导时的表达模式;构建DaAACT基因的过表达载体并异源转化拟南芥,并分析其功能。结果:克隆得到的川续断DaAACT基因全长1 780 bp,编码406个氨基酸;生物信息学分析表明DaAACT为稳定的亲水性膜蛋白;DaAACT与唇形科糙苏PuAACT聚为一支,同源性较高;DaAACT基因在川续断不同组织均有表达,在根中表达量最高,且受低温诱导表达;过表达DaAACT基因能促进拟南芥三萜化合物合成途径中AtHMGS、AtHMGCR、AtSE等基因上调表达,激活三萜代谢路径。结论:成功克隆得到川续断DaAACT基因,DaAACT在川续断的根、低温处理样品中表达量高,过表达DaAACT拟南芥中三萜皂苷合成关键酶基因表达上调,表明DaAACT基因具有促进川续断皂苷Ⅵ合成的潜在功能。

关键词:川续断;;DaAACT基因;;基因克隆;;表达分析;;川续断皂苷Ⅵ

基金资助:国家自然科学基金项目(82160725);; 贵州省教育厅高校科研平台团队项目(黔教技[2022]021号);; 中国中医科学院科技创新工程项目(CI2021B013)