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作者:肖子钧;徐磊;苗鸿雁;汪一得;杜世阳;刘伟;冯晶;
单位:武汉市第一医院脊柱外科;湖北中医药大学针灸骨伤学院;
摘要:目的:探究独活寄生汤对针刺诱导大鼠椎间盘退变的影响及机制。方法:将50只雄性SD大鼠采用随机数字表法分为假手术组、模型组和独活寄生汤低(5.4 g/kg)、中(10.8 g/kg)、高(21.6 g/kg)剂量组,每组10只。假手术组针头仅穿刺至皮下,其余各组大鼠尾椎间盘接受针刺建立模型。独活寄生汤各组大鼠分别灌胃相应剂量独活寄生汤,假手术组及模型组灌胃相应体积生理盐水,连续给药8 w。8 w后通过MRI观察椎间盘退变情况。HE染色、番红-固绿染色、Masson染色、茜素红染色评估髓核组织病理学改变;试剂盒检测髓核组织中Fe~(2+)、MDA、GSH、ROS、SOD水平;获取髓核组织,免疫组化法(IHC)检测髓核组织中COLⅡ、COLⅩ、MMP13表达;蛋白质免疫印迹法检测髓核组织中ACSL4、COLⅩ、FTH、GPX4、PTSG2、SLC7A11蛋白表达。结果:与模型组比较,各给药组大鼠椎间盘退变延缓,椎间盘Pfirrmann评级和髓组织Fe~(2+)、MDA水平显著降低,GSH水平显著升高,独活寄生汤高剂量组髓核组织ROS水平显著降低,独活寄生汤中、高剂量组髓核组织SOD活力显著升高(P<0.05或P<0.01)。HE染色、番红-固绿染色、Masson染色、茜素红染色结果显示,与模型组比较,各给药组髓核与纤维环界限更清晰,Masuda组织学评分显著降低,胶原纤维含量显著升高,钙结节显著减少(P<0.05或P<0.01)。IHC显示,与模型组比较,独活寄生汤中、高剂量组COLⅡ表达显著升高,各给药组COLⅩ、MMP13表达显著降低(P<0.01)。蛋白质免疫印迹法显示,与模型组比较,各给药组GPX4、FTH、SLC7A11蛋白表达显著升高,ACSL4、PTSG2、COLⅩ蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论:独活寄生汤能延缓针刺导致的大鼠椎间盘退变,该作用可能与抑制髓核细胞铁死亡有关。
关键词:独活寄生汤;;铁死亡;;椎间盘退变;;髓核;;椎间盘染色
基金资助:国家自然科学基金青年项目(82104899);; 湖北省自然科学基金项目(2024AFB1006);; 武汉市知识创新专项(2022020801020531)