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中药材2024年第01期:大果木姜子油调控miR-328基因抗心律失常H9c2细胞的机制研究

来源:期刊VIP网 时间:


作者:孙恒灿;张丽艳;李军;汪尊冬;汤小芳;刘维琴;

单位:贵州中医药大学;重庆市沙坪坝区中医院;

摘要:目的:探讨大果木姜子油通过调控miR-328基因抗心律失常H9c2细胞的可能机制。方法:慢病毒转染构建miR-328过表达H9c2细胞株,再运用生物机能实验系统构建H9c2细胞和miR-328过表达H9c2细胞心律失常模型。将H9c2细胞分为正常对照组、模型组、大果木姜子油组、miR-328过表达组和miR-328过表达+大果木姜子油组。根据分组条件培养结束后,qPCR检测H9c2细胞中miR-328相对表达量;ELISA检测炎性因子IL-1β、IL-6、TGF-β含量;比色法检测SOD活性和MDA浓度;DCFH荧光探针检测ROS水平;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western Blot检测H9c2细胞L型钙通道相关蛋白表达。结果:成功构建H9c2细胞和miR-328过表达H9c2细胞心律失常模型。与正常对照组比较,模型组和miR-328过表达组细胞TGF-β、SOD活性及CaM、CaMKⅡ、p-CaMKⅡ蛋白表达显著降低,细胞凋亡率、miR-328及CaV1.2蛋白表达和IL-1β、IL-6、MDA、ROS水平显著升高(P<0.01)。经大果木姜子油干预后,心律失常模型细胞形态改善,上述指标均被显著逆转(P<0.01)。结论:大果木姜子油可改善心律失常H9c2细胞,其作用机制可能与调控miR-328基因降低炎症因子水平、调节氧化应激、抑制细胞凋亡及调节L型钙通道相关蛋白表达有关。

关键词:心律失常;;大果木姜子油;;miR-328基因;;炎症因子;;氧化应激;;细胞凋亡;;L型钙通道

基金资助:国家自然科学基金项目(81760910,82060770);; 贵州省科技计划项目(黔科合后补助[2020]3003);; 贵州省科技支撑计划(黔科合支撑[2018]2770)