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中药材2024年第08期:基于TLR4/MyD88/NF-κB通路探讨小青龙汤对慢性肾炎的抗炎机制

来源:期刊VIP网 时间:


作者:柴溥苒;高夏夏;赖永健;柴希;储开博;张育敏;何丽清;

单位:山西中医药大学;

摘要:目的:通过构建脂多糖(LPS)诱导的HEK293细胞炎症模型,探讨小青龙汤通过调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路对慢性肾炎的作用机制。方法:采用CCK-8及LDH法检测不同浓度小青龙汤对HEK293细胞活力的影响。采用LPS(10μg/mL)诱导人胚肾细胞,建立炎症反应模型,观察不同浓度药物对LPS作用下HEK293细胞形态的影响。采用ELISA法检测各组细胞中TNF-α、IL-6、IL-1β水平。采用Western Blot检测各组细胞中TLR4、MyD88及核内NF-κB蛋白表达;采用免疫组化技术检测各组细胞中TLR4、MyD88及核内NF-κB蛋白表达;采用RT-PCR检测各组细胞中TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达。结果:在24 h内,小青龙汤浓度高于62.5 mg/mL时对细胞活力无明显影响,因此选择250、500、1 000μg/mL作为小青龙汤低、中、高浓度组。与模型组比较,小青龙汤能显著降低炎症模型HEK293细胞TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌和TLR4、MyD88、NF-κB mRNA及蛋白表达(P<0.05~P<0.001)。结论:小青龙汤可抑制LPS诱导的HEK293人胚肾细胞的炎症反应,其机制可能与调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路有关。

关键词:小青龙汤;;HEK293细胞;;脂多糖(LPS);;炎症模型;;TLR4/MyD88/NF-κB信号通路

基金资助:国家自然科学基金面上项目(82274365);; 山西省自然科学基金面上项目(20210302123228);; 山西省中医药管理局科研项目(2023ZYYB2038);; 2022年山西中医药大学科技创新团队项目(2022TD1011)