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作者：张华;王星迪;丁硕;鹿萱萱;高佳悦;周闯;
单位：江苏农林职业技术学院畜牧兽医学院;金陵科技学院动物科学与食品工程学院;甘肃农业大学动物医学院;
摘要：为了探究抗氧化应激机制并为新型功能性动物饲料提供重要资源，试验通过应用不同浓度(200,400,600,800,1 000μmol/L)H_2O_2处理猪小肠上皮细胞(IPEC-J2细胞)3 h,另设不加H_2O_2的空白对照，检测细胞存活率；使用细胞氧化模型确定的H_2O_2浓度处理IPEC-J2细胞不同时间(1,2,3,4 h)后，观察细胞形态，检测细胞活性氧相对荧光强度、Caspase-3表达和抗氧化酶活性，建立IPEC-J2细胞氧化应激模型。在此基础上，以缓解氧化损伤为筛选指标，检测益生菌的抗氧化特性，从新疆克州传统发酵乳制品分离出的8株益生菌中筛选出抗氧化益生菌。结果表明：400μmol/L H_2O_2处理IPEC-J2 3 h,细胞存活率为45.938 9%,表明细胞已受到一定程度的损伤，同时又保留了一定的细胞活力。因此，选择400μmol/L H_2O_2建立IPEC-J2细胞氧化应激模型。与空白对照相比，400μmol/L H_2O_2处理IPEC-J2细胞3 h,活性氧相对荧光强度极显著升高(P<0.01);过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01);细胞中Caspase-3蛋白穿梭入核现象明显并诱导细胞凋亡。在4株益生菌的预处理下，氧化损伤细胞的存活率和抗氧化酶活性均有所回升，其中加纳醋杆菌JK-23效果最好。说明IPEC-J2细胞氧化应激模型建立的最佳条件为400μmol/L H_2O_2处理3 h,并筛选出4株具有缓解细胞氧化应激作用的益生菌。
关键词：H_2O_2;;IPEC-J2细胞;;氧化应激;;益生菌;;抗氧化
基金资助：江苏农林职业技术学院青年扶持项目(2021kj24);江苏农林职业技术学院基金培育一般项目(2024kj33);; 江苏省高等学校基础科学(自然科学)面上项目(21KJB230002)
