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作者:管玉堂;尹际然;王金琦;徐颖;刘喆;殷国璐;金鑫;薛书江;
单位:延边大学农学院;
摘要:为了查明引起延吉市安图县某农户饲养牛只死亡的病原并了解其致病性,试验采集病死牛后腿肌肉具有病变的组织进行细菌的分离、纯化,通过形态学观察、革兰氏染色、生化鉴定试验、PCR扩增与测序对分离菌株进行鉴定,并将分离菌株感染小鼠,记录小鼠临床症状及死亡情况,剖检死亡小鼠,取病变组织制作病理切片并观察。结果表明:从病死牛后腿肌肉组织中分离出1株细菌,分离菌株经厌氧培养24 h后,在血琼脂培养基上可见圆形、呈纽扣状的白色或半透明菌落,且菌落周围呈现β溶血;革兰氏染色可见蓝紫色、粗大、两端钝圆、无荚膜的梭状菌,菌体单个存在或3~5个菌体形成短链。分离菌株可使明胶液化,能还原硝酸盐,分解葡萄糖,吲哚、过氧化氢酶、水杨苷、硫化氢试验呈阴性,与气肿疽梭菌生化特性一致。经PCR检测扩增到大小为501 bp的Cct A基因,与Gen Bank中气肿疽梭菌JF4335(登录号为LT199839.1,瑞士)的核苷酸序列相似性最高,为96.2%,确定分离菌株为气肿疽梭菌。小鼠注射分离菌株(剂量为2.5×10~6cfu)后第19小时出现行动迟缓、食欲不振、精神沉郁、腿部肿胀等临床症状,第47小时开始出现死亡,7 d内的死亡率为60%。剖检及病理检查可见肝脏、肺脏、脾脏和腿部肌肉均出现明显的病理变化。说明试验成功分离到1株气肿疽梭菌菌株,该菌株对小鼠具有致死性。
关键词:气肿疽梭菌;;分离;;鉴定;;致病性;;病理变化
基金资助:国家重点研发计划项目(2023YFD1300103)