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作者：陈席敏;周思旋;吴昊;朱祉聿;徐在品;陈家丽;陈玉霞;史开志;
单位：贵州大学动物科学学院;贵州省农业科学院畜牧兽医研究所;贵州省地方猪保护与繁育工程研究中心;
摘要：为了探究猪源枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis,B.subtilis) QXKL-3菌株对猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)的抑制效果，试验以培养B.subtilis QXKL-3获得的无细胞上清液(cell free supernatant,CFS)作为抑制剂，采用平板菌落计数法和打孔法评估QXKL-3 CFS对SS2的体外抑菌效果及其在不同条件下的理化特性(对温度的耐受性和在不同储存条件下的稳定性)，采用硫酸铵沉淀法提取抗菌物质，测定粗提物最小抑菌浓度(MIC)，利用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)联用技术进一步分析鉴定B.subtilis QXKL-3 CFS中的抑菌活性物质，并对抑菌活性物质进行KEGG通路分析。结果表明:B.subtilis QXKL-3 CFS可在10 min内完全杀灭SS2，其抑菌能力显著强于青霉素(1 mg/m L);当硫酸铵浓度为60%时抑菌圈直径最大，显著高于其他浓度(P<0.05)，通过60%硫酸铵沉淀得到的抗菌粗提物MIC为2.344 mg/m L; B.subtilis QXKL-3 CFS在121℃高压下处理30 min,-20℃、4℃及室温(25℃)条件下储存120 d仍具有较好的抗菌活性;经LC-MS/MS筛选鉴定出多种抑菌活性物质，包括表面活性素、杆菌烯、原儿茶酸等抑菌相关物质;涉及12个代谢通路，包括α-亚麻酸代谢、铁载体基团非核糖体肽的生物合成、次级代谢产物的生物合成等代谢通路。说明B.subtilis QXKL-3 CFS对猪链球菌具有较强的抑制作用，且具有多种抑菌活性物质，是一种极具前景的抗生素替代品。
关键词：猪源;;枯草芽孢杆菌;;无细胞上清液;;猪链球菌2型;;抑菌活性
基金资助：贵州省优秀青年科技人才计划项目(黔科合平台人才[2021]5616号);; 贵州省农业领域重点计划项目(黔科合支撑[2022]重点032);; 贵州省农业科学院科技创新项目(黔农科科技创新[2023]07号;黔农科科技创新[2022]01号)
