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作者：陈玉霞;周思旋;王婧;徐在品;青成欣;陈席敏;陈家丽;罗明星;史开志;
单位：贵州大学动物科学学院;贵州省农业科学院畜牧兽医研究所;贵州省地方猪保护与繁育工程研究中心;贵州农业职业学院;
摘要：为了利用柯乐猪资源开发能抑制猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype 2,SS2)且具有良好抗逆性和安全性的芽孢杆菌，试验从成年健康柯乐猪母猪粪便中分离芽孢杆菌，纯化后通过生化鉴定和16S r DNA基因的序列分析对分离菌株进行进一步鉴定，并对芽孢杆菌分离株进行广谱抑菌能力检测、猪链球菌2型临床菌株抑制能力检测、抗逆性评估(耐热性能检测、人工胃肠液耐受试验和胆盐耐受试验)及安全性评估(溶血性试验、小鼠安全性检测和耐药性检测)。结果表明:分离、纯化并鉴定到1株枯草芽孢杆菌，命名为枯草芽孢杆菌S-3;枯草芽孢杆菌S-3对4种革兰氏阳性菌(猪链球菌2型、猪链球菌1/2型、猪链球菌8型和金黄色葡萄球菌)和2种革兰氏阴性菌(大肠杆菌和肠炎沙门菌)均有抑制作用;且对猪链球菌2型和金黄色葡萄球菌的抑制作用较为明显。枯草芽孢杆菌S-3株与猪链球菌2型共培养体系及枯草芽孢杆菌S-3株培养上清液均可完全杀灭猪链球菌2型。随着温度的升高，枯草芽孢杆菌S-3株的存活率逐渐下降，当温度达到90℃时存活率为50.9%。该菌株在人工胃液、人工肠液、0.3%胆盐溶液和0.5%胆盐溶液中处理3 h的存活率分别为52.88%、92.35%、53.51%、54.24%。枯草芽孢杆菌S-3株无溶血性，灌喂后小鼠精神状态、行为和采食情况未见异常，各组织器官无明显病理变化，且对15种常见抗生素未表现出耐药性。说明分离到的枯草芽孢杆菌S-3具有广谱抑菌活性，对猪链球菌2型具有很好的抑制效果，并具有耐热、耐酸、耐胆盐的特性及良好的安全性，可作为理想的益生菌候选菌株。
关键词：柯乐猪;;猪链球菌2型;;枯草芽孢杆菌;;抑菌性;;抗逆性;;生物学特性
基金资助：贵州省优秀青年科技人才计划项目(黔科合平台人才[2021]5616号);; 贵州省农业领域重点计划项目(黔科合支撑[2022]重点032);; 贵州省农业科学院科技创新项目(黔农科科技创新[2023]07号;黔农科科技创新[2022]01号);; 贵州农业职业学院自然科学项目(yk230101)
